广东省羊种布鲁杆菌菌株分子分型.pdfVIP

·364 · 20 11 10 26 5 Chin J Ctrl Endem Dis Vol． 26 No． 5 20 11 中国地方病防治杂志 年 月第 卷第 期 广东省羊种布鲁杆菌菌株分子分型研究 ， ， ， ， ， ， ， 陈经雕 邓小玲 柯碧霞 刘美真 谭海玲 柯昌文 李柏生 张万里 ， (2003B60127)， 510300 广东省疾病预防控制中心 广东省应急病原学重点实验室 广东广州 中图分类号:R 516． 7 文献标识码:A 文章编号:1001－ 1889 (2011)05 －0364 －04 (Brucella) ， 。 布鲁杆菌 是一种胞内寄生兼性厌氧的 种布鲁杆菌 设计引物扩增部分片段 革兰阴性微小球杆菌， 、 、 Pm1 ∶ 5 ＇－AAC AAG CGG CAC CCC TAA AA－3＇ 可以经消化道 皮肤粘膜 呼吸 ， Pm2 :5 ＇－CAT GCG CTA TGA TCT GGT TAC G－3＇ 道等途径侵入机体而引起感染 布鲁杆菌侵入机体可 － PCR ， 25 l ，95 ℃ 10 引起传染 变态反应性的人畜共患传染性布鲁杆菌病 反应条件 反应体系为 μ 预变性 (Brucellosis ， )。20 90 ， min ;95 ℃ 1 min ，57 ℃ 1 min ，72 ℃ 1 min ，30 个循环， 布病 世纪 年代中期以后 由于 ， 最后延伸72 ℃ 5 min 。 我国疫区畜间疫情出现回升 导致人间布病疫情呈逐 1． 3． 3 (PFGE) ［4］ 年上升趋势，1996 ～ 2005 年全国人间布病发病率上升 脉冲场凝胶电泳 参照文献 并进 ， ， OD 了16 ． 7 倍，2008 年1 ～ 9 月底全国共报告病例24 407 行优化 主要的步骤有取新鲜培养菌落 制成 值 ［1］ 4 ． 8 ～ 5 ． 2 ， ， 50 ， 2007 23． 76% 。 的菌悬液 按常规方法包埋菌体细胞 用 例 较 年上升了 冮森林等 调研报告 U XhoI ， 0 ． 5 × : ( )( 、 的 限制性内切酶进行酶切 电泳槽中加 指出 历史上无疫情或疫情较轻的省 区 浙江 山 TBE 2 300 ml ，14 ℃ 、120 ° 、6 V / cm ， 、 、 )，