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不同产地柴胡多糖含量分析
精品论文 参考文献
不同产地柴胡多糖含量分析
张丽娜何奇
(吉林敖东洮南药业股份有限公司137100)
【摘要】目的:为柴胡的质量评价提供一个指标,从而为以多指标质量评价体系提供依据。方法:采用蒽酮-硫酸比色法,分别测定可溶性多糖和粗多糖的含量。结果:葡萄糖数与吸光度线性良好,R2=09993;平均回收率为101554%,RSD=178%。不同产地柴胡多糖河北含量最高,依次是陕西、吉林、安徽。结论:蒽酮-硫酸比色法简便、易行,适合柴胡多糖的含量测定,以控制其质量。
【关键词】:柴胡;不同产地;多糖
【中图分类号】R2 【文献标号】A 【文章编号】2095-7165(2015)07-0422-02
多糖是柴胡有效化学成分之一,是一种良好的免疫调节剂[1] ,柴胡多搪2Ⅱc显示很强的抗溃疡活性[2]。不同产地,相同成分含量也不等。下面通过实验测定不同产地多糖含量的差异。
1 材料与仪器
11 样品来源
(1)吉林(2)安徽(3)河北(4)陕西注:均由吉林农业大学李伟老师鉴定为柴胡。
12 仪器
(1)UV2401型可见分光光度计;(2)SB-3200型超声波清洗器;(3XS205型电子天平;(4)HH-6数显恒温水浴锅;(5)YB-IA真空干燥箱
13 试剂
蒽酮、葡萄糖、浓硫酸、盐酸、无水乙醇等,均为分析纯
2 实验方法[3]与结果
21 多糖类物质提取
可溶性多糖的提取精密称取柴胡粉末1000g,每个样品都称取三份,分别置100mL三角瓶中,加80%EtoH45mL,浸泡30min,超声30min,静置过滤,重复提取1次,过滤(保存滤渣),两次滤液置100mL容量瓶中,以80%EtoH定容至刻度。
粗多糖的提取将21中的滤渣晾干,加2%的盐酸45mL,置水浴中提取45min,放冷,滤过到100mL容量瓶中,再提取1次,过滤,洗涤滤纸,以2%盐酸定容至刻度。
22 显色剂(蒽酮-硫酸)的制备
取98%的浓硫酸76mL,稀释成l00mL溶液;精密称取蒽酮01000g,置100mL容量瓶中,加入上述配制的硫酸溶液至刻度并摇匀,冷却至室温,备用。
23 标准曲线的制备
231 试液的制备葡萄糖标准液:将葡萄糖于60℃烘1h,逐渐升温至105℃至恒重。精密称取1055mg,置100mL容量瓶中,用水溶解并至刻度,取6支试管,分别加葡萄糖标准液00mL、02mL、04mL、06mL、08mL、10mL,再分次加入水10mL、08mL、06mL、04mL、02mL、00mL,各管分别再加入50mL的显色剂,于620nm处测定吸光度。
232 标准曲线的绘制各管的吸收度依据浓度顺序分别为00000、01498、03023、04563、06108、07387。以葡萄糖数为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。得到回归方程为y=07472x+00027,线性R2=09993。
24 样品液的制备与测定
241 可溶性多糖的测定取提取液25mL,置25mL容量瓶中,用80%乙醇定至刻度。取10mL提取液加入试管中,再加显色剂50mL。另取一支试管加80%EtoH,再加显色剂50mL,作为空白。置水浴中10min,放至室温。于620nm处测定数据,各地柴胡中可溶性多糖平均含量如下:吉林312%;安徽383%;河北964%;陕西314%。
242 粗多糖的测定取提取液25mL,置25mL容量瓶中,用2%盐酸定至刻度,取10mL提取液加入试管中,再加显色剂50mL,另取一支试管加2%盐酸10mL,再加入显色剂50mL,作空白实验,置水浴中加热10min,放至室温,于620nm处测定数据,各地柴胡中粗多糖平均含量如下:
吉林824%;安徽652%;河北1018%;陕西867%。
243 总多糖含量根据可溶性多糖含量和粗多糖含量,计算总多糖的含量,各地柴胡中总多糖含量如下:吉林1136%;安徽1035%;河北1982%;陕西1181%。
25 回收率实验
精密称取已知可溶性多糖含量的柴胡(吉林)05g,5份,置锥形瓶中,分别加入2753mg/mL的葡萄糖对照品溶液2mL,按前面
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