塞来昔布与糖尿病肾病相关性分析研究.docVIP

精品论文 参考文献 塞来昔布与糖尿病肾病相关性分析研究 　李双 王晓梅 于扬 　　（辽宁大连大学附属中山医院 116001） 　　【摘要】目的 探讨塞来昔布与糖尿病大鼠肾病治疗中的作用机理。方法 55只大鼠分成对照组及模型组，模型组通过采用4周高糖高脂包含本合链脲佐菌素（STZ）诱导的方法来制备类似糖尿病的动物模型，然后随机将大鼠分成对照组、糖尿病组及治疗组，给药4周后测血肌酐、尿肌酐、尿微量白蛋白、血糖的变化，同时行各组肾组织中核转录因子kappa;B（NF—kappa;B）、CD68免疫组织化学检测并作相关分析。结果 给药4周后与正常对照组相比，糖尿病未治疗组血糖及肌酐清除率（Ccr）、尿微量白白蛋白、肾重/体重增加明显（Plt;0.01）；与糖尿病未治疗组相比，治疗组血糖及Ccr、尿微量白蛋白、肾重/体重均降低（Plt;0.05）；血胰岛素水平各组间差异无显著意义；糖尿病未治疗组肾组织中NF—kappa;B、CD68的表达较正常对照组明显增加，给药4周后NF—kappa;B、CD68的表达下降。结论 塞来昔布在糖尿病肾病的早期治疗中有明显的保护作用，其机制部分在于抑制了NF—kappa;B的表达，减轻肾组织中单核/巨噬细胞的浸润。 　　【关键词】塞来昔布 糖尿病 血糖 血胰岛素 肾重/体重 　　【中图分类号】R587.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）36-0014-02 　　糖尿病肾病（DN）是糖尿病的严重并发症，其主要病理改变表现为细胞增殖与肥大、肾小球细胞外基质（ECM）积聚及单核—巨噬细胞的浸润，而细胞因子与粘附分子是引起上述变化的主要因素。NF—kappa;B作为一种非常重要的核转录因子，广泛参与细胞因子及粘附分子的转录调节，在2型糖尿病中的作用正受到越来越多的关注。近来国内外一系列针对选择性环氧化酶2（COX-2）抑制剂治疗糖尿病大鼠模型的实验中均得出选择性COX-2抑制剂具有肾脏保护作用，他们通过观察选择性COX-2抑制剂对前列腺素合成的影响，对TGF—beta;1的抑制等方面来说明它的肾脏保护作用机理[1]。而目前尚未有关于选择性COX-2抑制剂对NF—kappa;B影响的相关报道。我们通过建立糖尿病大鼠模型，观察选择性COX—2抑制剂对肾组织中NF—kappa;B活化的影响以及NF—kappa;B活性改变与肾组织单核—巨噬细胞浸润的关系来进一步探讨选择性COX-2抑制剂在糖尿病中的肾脏保护机制。塞来昔布属于选择性环氧化酶2，（COX-2）抑制剂中均发现肾组织中COX-2表达增强[2，3]，得出选择性COX-2抑制剂具有肾脏保护作用[4，5]，他们通过观察选择性COX-2抑制剂对前列腺素的影响，对TGF-beta;1的抑制等方面来说明它的肾脏保护作用机制，而本实验中通过建立糖尿病大鼠模型，观察选择性COX-2抑制剂对肾组织中的CTGF调节来进一步阐述其作用机制。进一步探讨高选择性环氧化酶抑制剂-塞来昔布，对改善糖尿病血管炎性病变，延缓糖尿病慢性并发症，特别是对预防和减轻糖尿病肾病有着十分重要的作用。 　　1 材料和方法 　　1.1 糖尿病模型的建立 选取健康雄性Sprague-Dawley大鼠55只，体重180－250g，由大连医科大学实验动物中心提供，分笼温室饲养，自由进食饮水，术前禁食12小时，随机分成两组：对照组（n=15），喂以常规饲料；模型组（n=40），喂以高糖高脂饲料（常规饲料加25%蔗糖、15%猪油）。饲养1个月后测空腹血糖（FBG）及血浆胰岛素水平（FINS）并计算胰岛素敏感性指数：ISI=-In（1/FBGtimes;FINS）。 　　NF-KB单克隆抗体，CD68单克隆抗体分别购自Stanta cruz 公司。塞来昔布购自美国辉瑞公司。STZ 购自美国Sigma公司。One TouchⅢ血糖测定仪为美国强生Lifescan公司产品。透射电子显微镜为日本产JEM-1200EX。 　　1.2 造模和分组 　　40只大鼠腹腔内注射等体积枸橼酸盐溶液。DN大鼠随机分为糖尿病组（n=15）和塞来昔布灌胃组即治疗组（n=15）。DN模型建立第二天，塞来昔布灌胃组大鼠经口灌胃塞来昔布50 mg/kg,2次/天，DN组灌等体积生理盐水。各组大鼠单笼喂养，自由进食，饮水。于大鼠血糖升高后，每月测体重及空腹血糖(FBG)及血浆胰岛素水平（FINS），并计算胰岛素敏感性指数：ISI=-In（1/ FBGtimes; FINS）。所有大鼠饲养8周。除去死亡及血糖恢复正常大鼠，最终每组15只入组。 　　1.3 生化指标 血糖测定，采用One To