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复方大承气汤对急性重症胰腺炎大鼠肠黏膜屏障的保护作用
精品论文 参考文献
复方大承气汤对急性重症胰腺炎大鼠肠黏膜屏障的保护作用
孔俊1 沈丽莎1 朱春富2
( 1 江苏省常州市武进区横林人民医院 2 1 3 1 0 1 )
( 2 江苏省常州市第二人民医院 2 1 3 1 0 0 )
【摘要】目的 探讨复方大承气汤对急性重症胰腺炎(SAP)大鼠肠黏膜屏障的保护作用。方法 40 只SD 大鼠分为三组:A 组(假手术对照组,n=10)、B 组(SAP 模型组,n =15)、C 组(S A P + 大承气汤剂治疗组,n =15)。采用胰管内注射5% 牛黄胆酸钠溶液的方法建立大鼠S A P 模型,于建模后1h、8h 分别经口灌胃,给予复方大承气汤(1m L /100g,治疗组)、生理盐水(1m L /100g,对照组和模型组)。24h 后无菌条件下开腹,取门静脉血检测内毒素水平,取肠系膜淋巴结作细菌培养,小肠腔内注入0.2% FD4 溶液测定肠黏膜通透性。结果 模型组与大承气汤组内毒素浓度、肠黏膜通透性皆显著高于假手术组(P < 0.01),但大承气汤组两指标皆显著低于模型组(P < 0.01);细菌培养结果提示模型组阳性率显著高于假手术组和大承气汤组(P < 0.05),大承气汤组阳性率与假手术组比较无统计学意义(P > 0.05)。结论 复方大承气汤对SAP 大鼠肠黏膜屏障有一定的保护作用。
【关键词】 重症急性胰腺炎 复方大承气汤 肠黏膜屏障 大鼠
【中图分类号】R961.1 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2012)11-0007-01
重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP) 常并发肠黏膜功能障碍,后者可导致肠道细菌移位、内毒素血症等,从而进一步导致全身炎症反应综合症等。保护肠黏膜屏障的完整性是SAP 治疗的重要环节之一。大承气汤是伤寒论的经典方剂之一,具有通里攻下、峻下热结之功效,其对SAP 具有肯定的疗效[1]。复方大承气汤是在大承气汤的基础上根据病症适当加味的方剂,其对SAP 的治疗作用已有报道[2]。本文研究复方大承气汤对肠黏膜屏障的保护作用。
1 材料与方法
1.1 实验动物与分组 健康成年Sprague-Dawley 大鼠40 只(购自中科院上海实验动物研究所),清洁级,雌雄各半,质量200-250g,周龄6wk,适应性喂养1 wk 后进入实验。大鼠随机分为三组:A 组(假手术对照组,n=10)、B 组(SAP 模型组,n=15)、C 组(SAP+ 大承气汤剂治疗组,n=15)。
1.2 实验试剂 牛磺胆酸钠及异硫氰酸- 葡聚糖 4400(FD4) 皆购自 Sigma 公司,内毒素检测试剂盒购自厦门市鲎试剂实验厂有限公司。复方大承气汤配方:生大黄15g,芒硝10 g,厚朴15g,枳实15g,柴胡15g,白芍10g,黄岑10g,丹参15g,水煎取汁100mL 待用。
1.3 模型建立及处理
实验大鼠实验前禁食12h,自由饮水。乙醚麻醉后, 皮肤消毒、铺单, 腹部中线切口开腹,显露十二指肠及胆管。参照Frossard 等[3] 的方法建立SAP 模型,主要步骤包括:经十二指肠乳头插管至胆胰管约1cm,用无损伤显微血管夹阻断胆管后,以0.1 ml /mi n 的速度缓慢注入5% 牛黄胆酸钠溶液(1ml/kg),注射完毕后退出导管,关闭十二指肠伤口; 5min 后去除血管夹,同时观察胰腺出现充血、水肿及片状出血灶,确认S A P 模型建立成功后关闭腹腔。对照组仅予以麻醉、消毒、开腹及显露十二指肠、关腹等操作;治疗组大鼠造模同模型组。于建模后1h、8h 分别经口灌胃,给予复方大承气汤(1mL /100g,治疗组)、生理盐水(1mL/100g,对照组和模型组)。
1.4 标本采集及处理 建模24h 后再次麻醉大鼠,无菌条件下开腹后进行如下操作:(1)内毒素测定。抽取门静脉血液1ml,肝素抗凝后1000r/min 离心10min,提取血浆后,利用内毒素检测试剂盒检测内毒素水平;(2)肠黏膜通透性测定。分离出小肠远、近端及肾蒂血管, 分别予以结扎,从近端小肠向腔内注入0.2% FD4 溶液5ml,1h 后抽取门静脉血液1ml,肝素抗凝,1000r /mi n 离心10m in,提取血浆后检测FD4 浓度;(3)细菌培养。分别取肠系膜淋巴结(每只大鼠取3 枚), 分别制作成组织匀浆后,接种于琼脂培养基内,37℃孵育48h 后观察培养结果,凡培养出细菌者即为阳性。
1.5 统计学处理 计量资料采用均数plusmn; 标准差(Meanplusmn;SD) 表示, 各组间均数比较采用单因素方差分析
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