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调控人脑胶质瘤中ezrin表达的miRNAs筛选及鉴定
调控人脑胶质瘤中ezrin表达的miRNAs筛选及鉴定
徐小琳 江海波 盛莉莉 葛瑞祥 沈军 毛捷
皖南医学院第一附属医院弋矶山医院循证医学教研室 皖南医学院第一附属医院弋矶山医院神经外科 皖南医学院第一附属医院弋矶山医院肿瘤科
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摘????要：
目的:探讨调控人脑胶质瘤中ezrin的miRNAs筛选及鉴定。方法:针对ezrin的测序序列, 在线使用Target Scan、PITA、MicroRNA.org、miRGator v2.0、miRDB等5种生物信息学软件预测分析可能调控ezrin的miRNA分子, 运用荧光素酶报告载体实验检测筛选候选miRNA分子, RT-PCR检测11例胶质瘤组织和10例正常组织中候选miRNA分子mRNA的表达。结果:5种生物信息学软件预测出819个可能调控ezrin的miRNAs, 根据评分结果同时结合目前国内外研究成果筛选出miR-148a、-204、-205、-34b、-370、-376b、-377、-410、-495、-548a-3p、-630和-96等12个miRNAs。双荧光素酶质粒与ezrin 3-UTR作用位点突变体实验, 证实hsa-miR-204与相应作用位点突变体EZR 204 Mutant无明显作用 (P0.05) , RT-PCR结果显示miR-204在脑胶质瘤组织中的表达低于正常脑组织, 差异有统计学意义 (P0.01) 。结论:胶质瘤组织中miR-204可通过靶向调控ezrin表达发挥生物学作用。
关键词：
miR-204; ezrin; 胶质瘤; 荧光素酶报告载体; 生物信息学;
作者简介：徐小琳 (1973-) , 女, 助理研究员, (电话) (电子信箱) xxiaolin66@163.com;
作者简介：盛莉莉, 女, 副主任医师, (电子信箱)163.com, 通信作者;
作者简介：毛捷, 男, 副主任医师, 副教授, (电子信箱) myw921@163.com, 通信作者。
收稿日期：2017-02-15
基金：安徽省自然科学基金项目 (1408085MH205;1708085MH231)
Screening and identification of microRNAs targeting ezrin in human glioma
XU Xiaolin JIANG Haibo SHENG Lili GE Ruixiang SHEN Jun MAO Jie
Department of Evidence-based Medicine, The First Affiliated Hospital of Wannan Medical College;
Abstract：
Objective: To screen and identify microRNAs targeting ezrin in human glioma. Methods: On-line software, including Target Scan, PITA, , miRGator v2.0 and miRDB, were used to predict potential microRNAs capable of regulating ezrin expression. Dual Luciferase Reporter Assay System was used to determine the luciferase activity of the candidate microRNA genes, and real-time PCR, to detect the mRNA values of the candidate microRNAs in the samples obtained from 11 cases of glioma and brain tissues from 10 healthy subjects. Results: The candidate microRNAs, including miR-148 a, -204, -205, -34 b, -370, -376 b, -377, -410, -495, -548 a-3 p, -630 and-96 were selected from 819 potential microRNAs that were predicted to regulate the expression of ezri
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