MMP-9及TIMP-1在非小细胞肺癌中的表达及意义.docVIP

精品论文 参考文献 MMP-9及TIMP-1在非小细胞肺癌中的表达及意义 姜国栋 滕俊策 王忠芬 王志武 （招远市人民医院胸外科 云南招远 265400） 【中图分类号】R742 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085(2010)19-0133-05 【摘要】 目的 检测非小细胞肺癌(NSCLC)中基质金属蛋白酶9（MMP-9）及金属蛋白酶抑制剂1（TIMP-1）的表达情况，探讨MMP-9及TIMP-1的表达水平与非小细胞肺癌的组织学分型，细胞分级，淋巴结转移，临床病理分期的关系及临床意义。方法 采用免疫组织化学SP法对非小细胞肺癌患者，随机选取肿瘤原发灶蜡块保存良好及随访资料完整的病例43例及15例正常肺组织切片进行免疫组织化学染色，监测MMP-9及TIMP-1的表达水平，并分析非小细胞肺癌中MMMP-9及TIMP-1的表达水平与非小细胞肺癌的组织学分型，细胞分级，淋巴结转移，临床病理分期及患者预后的关系。结果 MMP-9和TIMP-1在正常肺组织中均有表达，表达部位主要在肺间质，表达强度较弱；MMP-9及TIMP-1在非小细胞肺癌中的表达主要位于癌细胞和癌旁间质细胞，均在胞浆内表达，癌细胞表达较强，间质细胞表达较弱；非小细胞肺癌组织中MMP-9和TIMP-1的阳性表达率均显著高于癌旁正常肺组织（Plt;0.05）。MMP-9和TIMP-1的表达与肿块大小及部位无关（Pgt;0.05）；MMP-9在腺癌中的阳性表达率高于鳞癌（Plt;0.05），TIMP-1在腺癌和鳞癌中的阳性表达率差异无显著性(Pgt;0.05)，MMP-9的阳性表达率随组织分化程度的增加而有降低趋势，TIMP-1的阳性表达率随组织分化程度的增加而有增强趋势。MMP-9的阳性表达率随P-TNM分期增高而增加，TIMP-I阳性表达率随P-TNM分期增高而降低；有淋巴结转移者MMP-9和TIMP-1的阳性表达率高于无淋巴结转移者(Plt;0.05)；MMP-9的阳性表达率与患者3年生存期呈负相关(Plt;0.05)，TIMP-9 的阳性表达率与患者3年生存期呈正相关(Pgt;0.05)。 【关键词】 非小细胞肺癌 基质金属蛋白酶9 基质金属蛋白酶抑制剂1 免疫组织化学 有研究表明MMP-9及其抑制剂TIMP-1的表达异常与人恶性肿瘤的浸润与转移密切相关。肺癌发病率和死亡率50年来不断上升，已成为增长最快的一种恶性肿瘤，严重威胁着人类健康与生命，本研究旨在用免疫组织化学方法检测和分析原发性非小细胞肺癌中MMP-9和其抑制剂TIMP-1的表达情况，并探讨其与肺癌病理分型、临床分期和淋巴结转移临床资料的关系，为进一步应用以MMP为靶点的抗肿瘤治疗提供理论依据 1 材料和方法 1.1标本来源及处理 标本选自本院2001年1月至2008年12月手术切除后经病理病理的NSCLC标本43例（追观资料完整）及本院2001年7月至2008年5月正常支气管上皮组织15例（成人非肺癌解剖组织）。43例NSCLC患者中，男性35例，女性8例，男女之比4.37:1；年龄24-68岁；肿块直径gt;3cm 25例，le;3cm 18例；中央型肺癌20例，周围型肺癌23例。所有标本均经10%的福尔马林液固定，常规石蜡包埋连续切片，厚4mu;m，分别作HE染色和免疫组织化学染色。 所有组织蜡块重新切片、HE染色、阅片。43例NSCLC中鳞癌21例，腺癌22例，高分化癌（gradel，G1）7例，中分癌22例（grade2，G2）、低分化癌症14例（grade3，G3）。 I期11例，II期21例，III期限11例。按淋巴结转移发生与否分组，有淋巴结转移11例，无淋巴结转移32例。所有43例患者均有完整的随访资料。患者术前均未进行化学治疗及放疗。 1.2 实验方法 免疫组织化学S-P法：（1）石蜡切片常规二甲苯???蜡，梯度酒精至水化，蒸馏水浸泡5分种。（2）室温下3％H2O2作用10分钟，阻断内源性过氧化酶的活性。（3）蒸馏水冲洗，PBS浸泡5分钟。(4)用于检测抗原的切片经0.01M枸橼酸钠抗原抗原修复液修复15分钟。(5)PBS洗2times;5分钟。(6)滴加5％山羊血清室温下孵育15分钟。(8)除去血清，不洗，滴加一抗温盒内4℃冰箱过夜，PBS液洗3times;5分钟。(9)滴加二抗，室温下孵育30分钟，PBS液洗3times;5分钟。(10)滴加三抗，室温下孵育30分钟， PBS液洗3times;5分钟。(11)滴加DAB显色，显微镜下观察至显色较好时，置于自来水终止显色。(12)流水充分冲洗，苏木