油松植物内生真菌研讨.pdfVIP

中英文摘要- 摘 要 本研究选取油松 (Pinustabulaeformis)作为研究对象，从辽宁省具有不同 生境特点的地区一东南部的凤凰山和西北部的凌源采集植物组织，研究油松植 物不同组织中内生真菌的丰度、多样性以及侵染特点，揭示不同生境对内生真 菌群落组成和分布的影响。该研究从两个样地分别随机选取30株油松，而且从 每株植物上选取一个健康树枝，将枝条按组织分为树叶、枝条树皮和木芯三部 分，然后将每一部分切成约5mm的组织块进行内生真菌分离。从432。个植物 组织块中分离到2065株真菌，1860株可以产生抱子，占分离菌株总数的89%, 205株 (114%)不产抱子。鉴定到9属21个分类单元，其中获得4个中国新纪 录种一Pesfalotiopsiscitrina,Phomopsisarcheri,Seimatosporium lonicerae, Sporormiellaminimoides. 虽然我们采用不同的培养基与培养条件，以促进菌株的产抱，但是仍有约 11%的菌株不能形成产抱结构和抱子，所以这部分内生真菌就不能用经典的形 态学方法确定它们的分类地位。为了确定它们在真菌界的系统位置，我们通过 研究真菌rDNA中特定基因序列来反映它们的系统发育关系。按照不产抱菌株 的培养特征，把它们分为74个形态型类群，对每个形态型的代表菌株进行ITS 区 (5.8S基因和ITSI,2)PCR扩增与测序，然后结合不同形态型菌株与参考 菌种序列碱基相似性和系统发育关系分析，确定它们的分类地位。研究结果表 明，在74个形态型菌株中，2个形态型菌株鉴定到种，62株鉴定到属，6株放 到科，4株放到目;这74个形态型菌株划分为64个分类单元. 在本次研究中，我们还对分离的45株Epicoccum菌株进行形态和分子鉴定， 结果表明虽然不同菌株之间的形态特征有非常大的变化，但是ITS序列分析证 明它们同为一个种Epicoccumnigrum，这从分子水平上验证了前人提出的在 Epicoccum菌种的鉴定中形态学特征的不可靠性。 关键词:油松，内生真菌。新纪录种，形态型，分子鉴定，生态学 油松植物内生真菌研究 EndophyticFungiAssociatedwithPinustabutaeformis (Abstract) WangYu(Microbiology) DirectedbyProfGuoLiang-bong ThediversityofendophyticfungiofPinustabulaeformiswascarriedoutat differentenvironmentalsites,i.e.FenghuangshanandLingyuanofLiaoning ，province.Thirtyplantswererandomlychosenrfomeachsiteandonehealthbranch wascutrfomeachplantinthisstudy.Eachselectedbranchwasdividedintothree ageclasses,i.e.1一，2-,and3-yr-oldbrancheswithneedles.Needlesandbranches (barkandxylem)removedrfomeachageclasswerecutinto5mmsegments.Atotal of2065isolatesofendophyticfungiwererecoveredrfom4320tissuesegmentsofP tabulaeformis,ofwhich1860isolatessporulatedandwereidentifiedinto21 differentfungaltaxabasedonmorphologicalcharacteristics,includingfournew recordsPestalotiopsiscitrina,Phomopsisarcheri,Seimatosporium lonicerae, Sporormiellaminimoides