微囊化重组CHO细胞培养生产内皮抑素(1)研究.pdfVIP

所属领域：I 医药生物化学工程 微囊化重组CHO细胞培养生产内皮抑素 张英,王为,马小军 中国科学院大连化学物理研究所生物医学材料工程组, 辽宁大连 116023 摘要： 生物微胶囊技术是近二十年发展起来的一门新兴的、具有很大发展潜力的固定化技术，目前已在异体组 织细胞移植、药物控制释放等领域获得广泛的应用。1986 年，Damon 公司将微囊化技术应用到单克隆抗体 生产中，并且获得了较高的细胞密度和较大的抗体产量。本实验考察了微囊化细胞进行规模化培养生产重 组蛋白的可行性，并且考察了间歇培养和连续培养时微囊化重组CHO 细胞生长、代谢和重组内皮抑素表达 7 的规律。实验结果显示，间歇培养时最大活细胞密度达到2.66 ×10 cells/mL microcapsule ，培养结束时内皮 7 抑素浓度达到891.3ng/mL。连续培养时在第15 天时活细胞密度最大，为8.77 ×10 cells/mL microcapsule ， 7 然后微囊内的活细胞密度稳定在8.4 ×10 cells/mL microcapsule 左右。培养液内内皮抑素浓度在第16 天时 最高，为1142.2 ng/mL。因此，微囊化细胞适合在搅拌式生物反应器中规模化培养, 在培养过程中细胞活性 保持良好，并且连续培养由于提供充足的营养物质及移去代谢副产物更有利于细胞生长和内皮抑素表达。 关键词：微胶囊，规模化培养，重组CHO细胞，内皮抑素 Application of microencapsulation technology in recombinant protein production ∗ ZHANG Ying, WANG Wei, MA Xiao jun Dalian Institute of Chemical Physics, Chinese Academy of Sciences, Dalian 116023, Liaoning, China Abstract: Microencapsulation technology is a novel promising approach to cell immobilization in recent twenty year, and has been used preferentially to the transplantation of cells and tissue and delivery of drug. This technology has been applied to large-scale mammalian cell culture for antibody production by Damon Biotech in the early 1980s, and has acquired higher cell density and antibody production. In this paper, we study the feasibility of protein production by microencapsulated recombinant cells culture, and study the cell growth, metabolism and endostatin production in batch and continuous culture. The results showed that the cell