miR-145真核表达载体的构建及表达.pdfVIP

910 实用预防医学2012年6月第19卷第6期Practical 文章编号：1006—3110(2012)06—0910—03 -实验研究与卫生检验检测· miR一145真核表达载体的构建及表达 谢海涛 摘要： 目的 构建miR一145的真核表达载体．为研究miR一145在结肠癌中的生物学功能奠定基础。方法 将重组质粒转染入结肠癌细胞系HCl、116中。运用RT—PCR检测miR一145的表达情况。结果 酶切及DNA测序证 结 论 成功构建了miR一145的真核表达载体oCMV—miR一145，该载体能有效高表达miR一145。 关键词：miR一145；真核表达载体；构建；表达 中图分类号：R392—33 文献标识码：B Construction andExpression ofaEukao,oticVectorforIntR一145X／EHal一拗(Department 421001，Hunan，China) 五maffiliatedhospitalofUni∞rs匆ofSouth西ina，Hengyang Abstract： Toconstructa vectorformiR一145．80asto afoundationfor Objective eukaryotieexpression lay exploring its functionincolonC∞Cel．MethodsThe OfmiR一145wasobtainedPCRandinsertedintoa biological genefragment by constructed tr∞Aectedintothecoloncall一 eukaryotieexpressionplasmad，pcrcrv—myc．Theplasmid，oCMV—miR一145，w8s eeleelllineH四116．1r11eofmiR一145WSSdetectedreal—timePCR．ResultsTheSuccessfHl expressionlevel by cloningof miR一145into vecVcor WaSconfirmed andDNA theeukaryotic pcMV—mye bytTtzyrnedigestion analysis． expression sequencing Thereconstructedcould increasethe ofmiR一145in咐r116cells．ConclusioeaAeukaⅣ． plasmidsignificantly expression otic vectorfor constructed．Itcan miR一145， expression miR一145，pEMV—miR一145，issuccessfully highlyexpras8 Words：miR一145；Eukaryoticexpression Key vector；Construction；Expression