两种方法检测乙型肝炎病毒表面抗原的比较.docVIP

精品论文 参考文献 两种方法检测乙型肝炎病毒表面抗原的比较 傅真 　　（杨浦区疾病控制中心检验科 上海 200090） 　　【摘要】 目的：探讨我院酶联免疫吸附试验和胶体金免疫层析法检测乙型肝炎病毒表面抗原的差异。方法： 收集我院2014年1月至2014年12月送检的血清标本，共有2042份。男性1000例，女性1042例，对每一份标本随机编号，然后进行平行检测，胶体金免疫层析法的对照线出现红色为阴性。酶联免疫吸附试验P/N值大于或等于2.1为阳性。以酶联免疫吸附试验为金标准，计算胶体金免疫层析法灵敏度、特异度。结果：胶体金免疫层析法的特异性及敏感性分别为100%、85.6%，K=0.97，与酶联免疫吸附试验结果一致性较好。结论：本次研究认为胶体金免疫层析法检测乙型肝炎病毒表面抗原快速，简便，但灵敏度低。 　　【关键词】ELISA；GICA；HBsAg 　　【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）13-0099-02 　　在临床中乙型肝炎病毒的检测法主要有酶联免疫吸附试验（ELISA）和胶体金免疫层析法（GICA）。酶联免疫吸附试验灵敏度高，可以检查到纳克水平的乙型肝炎病毒,但主要缺点是操作步骤多，费时长。胶体金免疫层析法特点是快速简便,在一些基础医院或社区卫生中心即可开展对乙型肝炎病毒的初筛。我们查阅近几年文献，发现关于两种检测方法的报道较少，因此收集我院2014年1月—2014年12月乙型肝炎病毒血清标本，对比酶联免疫吸附试验和胶体金免疫层析法的检测特异性及敏感性。 　　1.资料与方法 　　1.1 病例选择 　　收集我院2014年1月至2014年12月送检的血清标本，共有2042份。男性1000例，女性1042例，年龄17～67岁，平均年龄（42.6plusmn;12.8）岁。所有研究对象均签定知情同意书，保密知情书。 　　1.2 抽血方法 　　所有研究对象在早餐7点～8点进行抽血，抽血前均为空腹状态，抽取肘部静脉血后立即送检，放入离心机中离心，然后放入冰箱中统一备检。 　　1.3 试剂 　　酶联免疫吸附试验试剂盒购自上海博谷生物科技有限公司,批胶体金试剂盒由上海金标生物科技有限公司提供,批号W质控血清购于中华人民共和国卫生检验中心,批准文号配制成1.5、0.5ng/mL和0.25ng/mL待用。 　　1.4 仪器 　　采用URANS AE全自动酶免仪，由爱康公司生产。采用Elecsys 2010全自动电化学发光免疫分析仪。 　　1.5 研究方法 　　采用双盲的方法，对每一份标本随机编号，然后有具有副主任资格的检验医生进行操作，进行平行检测，即A标本先使用胶体金免疫层析法检测，然后进行酶联免疫吸附试验检测，并进行结果对比。对于阳性标本重复检测一次。胶体金免疫层析法的对照线出现红色为阴性。酶联免疫吸附试验P/N值大于或等于2.1为阳性。 　　1.6 统计学方法 　　将资料录入 Econometrics Views6.0统计软件，以酶联免疫吸附试验为金标准，根据胶体金免疫层析法的结果绘制ROC曲线，灵敏度为纵坐标，特异度为横坐标。使用Kappa检验,当Kgt;0.75表明一致性为优。 　　2.结果 　　2.1 酶联免疫吸附试验和胶体金免疫层析法检测结果对比 　　酶联免疫吸附试验共发现HBsAg阳性标本195份，其中胶体金免疫层析法检测发现163份标本为阳性，32份标本为阴性。酶联免疫吸附试验共发现HBsAg阴性标本1847份，胶体金免疫层析法检测发现1879份标本为阴性，其中32份标本为假阴性。胶体金免疫层析法的特异性及敏感性分别为100%、85.6%，K=0.97，一致性较好，见表。 　　3.讨论 　　我们本次研究发现胶体金免疫层析法诊断乙型肝炎病毒表面抗原的特异性及敏感性分别为100%、85.6%。可以看出胶体金免疫层析法诊断乙型肝炎病毒表面抗原灵敏度较低。有研究指出胶体金免疫层析法最低检测浓度仅为2ng/ml，因此造成较高的漏诊率。可能与以下原因有关：（1）每次使用的胶体金免疫层析法试剂的原材料、生产技术不一[1]。（2）血清中乙型肝炎病毒抗原量过少时,会引起结果的假阴性。但是其优点十分突出，如方便使用，操作简单；10～15分钟即可得出结论；不需冷藏；检测成本低；检测范围广，可用于查血、尿液或粪便标本[2]。 　　酶联免疫吸附试验又称ELISA法。酶联免疫吸附试验应用吸附于载体表面的抗原,于相应抗体结合后形成免疫复合物,与酶标记的第二抗体结合后形成免疫反应,借助酶对底物发生降解作用后显现的颜色反应进行判断。研究[3,4]指出EL