山茱萸中5-羟甲基糠醛的实验研究.docVIP

山茱萸中5-羟甲基糠醛的实验研究 安晏（安阳职业技术学院医药卫生学院 河南安阳 455000） 【摘要】目的:研究山茱萸炮制过程对5-羟甲基糠醛(5-HMF)含量变化的影响。方法: 选择炮制过程中的蒸制时间、加酒量、蒸制温度等可能影响5-羟甲基糠醛含量的因素制成不同样品经80%甲醇超声波提取45min,利用HPLC分别在284 nm,流速1.0 mL?min-1,流动相乙腈-水（5∶95）条件下测定5-HMF的含量。同时以温度、湿度、光照等因素对5-HMF进行稳定性考察。结果: 山茱萸中5-羟甲基糠醛含量随蒸制时间及温度增高而增高，说明加热有助于5-羟甲基糠醛的生成。辅料用量为15%～20%较合适。湿度对5-羟甲基糠醛影响较小，温度对其含量影响最大。结论:分析了酒山茱萸炮制对5-HMF含量的影响,为进一步研究山茱萸提供了依据。 【关键词】酒山茱萸 5-羟甲基糠醛(5-HMF) HPLC 【中图分类号】R965 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）04-0066-02 15－羟甲基糠醛影响因素的考察 1.1 仪器与试药 1.1.1仪器 美国安捷伦1100型高效液相色谱仪（美国安捷伦公司），KQ-500B型超声清洗器（昆山超声仪器有限公司）,电子天平（FA1104），LXJ-IIB低速大容量多管离心机，高速万能粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）。 1.1.2 试剂 乙腈（色谱纯），甲醇（色谱纯），水（重蒸水）,其他试剂均为分析纯 1.1.3 试药 5-羟甲基糠醛对照品（中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号：127860-200508） 1.2 方法与结果 1.2.1 炮制方法 1.2.2 蒸制时间的考察：分别以2、6、10小时，加黄酒20%，闷润1小时，对山茱萸进行常压蒸制，取出，60℃干燥，即得。 1.2.3 加醇量的考察：分别加0%、10%、15%、25%、30%黄酒，闷润1小时，对山茱萸常压蒸制6小时，取出，60℃干燥，即得。 1.2.4 蒸制温度的考察：分别以105℃、110℃、115℃、120℃、125℃、130℃，加黄酒20%，闷润1小时，对山茱萸高压蒸制1小时，取出，60℃干燥，即得。 1.3 5-羟甲基糠醛的含量测定 1.3.1 色谱条件 依利特Hypersil ODS柱（5mu;m，4.6mmtimes;250mm）色谱柱，以乙腈-水（5∶95），流速：1.0mL/分钟，检测波长284nm[1]。 1.3.2 5-甲基糠醛对照品溶液的配制 精密称取5-羟甲基糠醛对照品适量，以甲醇定容配成52.2ug/ml的对照品溶液。 1.3.3 线性关系考察 标准曲线的制备：精密量取52.2ug/ml的5-羟甲基糠醛对照品溶液适量稀释成浓度为3.88、5.22、10.44、20.88、31.32ug/ml的对照品溶液。分别精密吸取上述对照品供度液各10ul，注入高效液相色谱仪，测定峰面积。以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程Y=80.4851X+22.2411,r＝0.9995，线性范围0.0388～0.3132ug。见表1。 表1 5-羟甲基糠醛标准曲线和线性方程 1.3.4 样品溶液的制备 取药材粉末0.1g,精密称定，置具塞离心管中，精密加入80%甲醇25ml,超声处理45min，离心后过滤,定容至25ml。精密量取上述样品溶液10mu;l分别注入色谱仪进行测定，将结果带入工作曲线方程计算5-羟甲基糠醛的含量。计算结果见表2，表3,表4. 表2 5-羟甲基糠醛受蒸制时间影响考察表 实验结果表明山茱萸中5-羟甲基糠醛含量随蒸制时间及温度增高而增高，说明加热有助于5-羟甲基糠醛的生成。辅料用量为15%～20%较合适，说明pH值对5－羟甲基糠醛的生成有影响。 2 5-羟甲基糠醛稳定性考察 在考察了5-羟甲基糠醛影响因素的基础上，对5-HMF在高温、高湿、强光条件下的稳定性进行研究，为控制5-HMF含量及山茱萸炮制机理研究奠定基础。 2.1 仪器与试药 同1.1项下。 2.2 方法与结果 2.2.1 高温实验 取山茱萸生品、常压制品、高压制60℃下