山茶炭疽病菌生物学特性研究及其室内毒力测定.docVIP

山茶炭疽病菌生物学特性研究及其室内毒力测定 安徽省旌德县林业局旌阳镇林业站 安徽旌德 242600 【摘 要】山茶，属于山茶科山茶花属，为中国传统十大名花之一。因其植株形姿优美，叶浓绿而光泽，花形艳丽缤纷，花色繁多，花姿丰盈，而受到世界园艺界的珍视。常近几年来，很多地区栽培的茶花常受到炭疽病侵害，导致叶片脱落，花期不一致，花质量差，严重影响了山茶花的观赏价值。本文主要从营养、pH值、温度、光照条件方面对山茶炭疽病病菌进行了生物学特性研究，同时对防治炭疽病效果较好的3种常规的广谱性杀菌剂进行了室内的毒力测定，这将会为山茶花炭疽病的病害防治提供理论依据。 【关键词】山茶炭疽病；生物学特性；毒力测定 1 材料与方法 1.1菌株来源 2014年3月对采至于旌德县振宇花木有限公司的山茶炭疽病病叶，进行显微鉴定，确定其病原为山茶炭疽病菌，属半知菌亚门腔孢纲黑盘孢目黑盘孢科炭疽菌属。并采用组织分离法对病原菌进行了分离培养，获得纯菌株。 1.2营养对菌落径向生长的影响 将直径4cm菌丝块接种于马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）、燕麦芽汁琼脂培养基（MA）、麦片琼脂培养基（OA）平板上，置光照培养箱中，25℃温恒培养，每个处理设3个重复。每天测量不同培养基上的菌落直径，并记录菌落特征，以了解同一菌种在不同培养基上的培养性状。菌培 1.3 pH值对菌落生长的影响 用0.1mol/L HCl和0.1mol/L NaOH溶液将经高温灭菌后的PDA培养基的pH分别调至2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0，将直径4cm菌丝块接种后置于25℃恒温培养，共10个处理，每个处理3次重复，每天测量各菌落直径，观察记录菌落培养性状，并确定菌落生长最适pH值。 1.4温度对菌落生长的影响 将直径4cm菌丝块接种到PDA平板上，分别置于5℃、10℃、15℃、20℃、24℃、25℃、26℃、28℃、30℃、35℃下恒温培养，每个处理3次重复，每天测量菌落直径，观察记录菌落培养性状，并确定菌落生长的最适和极限温度。 1.5光照对菌落径向生长的影响 将分离到的目的菌定量接种到PDA培养基上，分别在室内漫射光—黑暗自然交替、全光照、全黑暗下，25℃恒温培养。每个处理3次重复，每天测量各菌落直径。 1.6不同杀菌剂对病原菌菌丝生长的毒力测定 1.6.1 药剂及含药培养基的配制 注：ＷＰ为可湿性粉剂 在无菌操作条件下，将各药剂分别配制成所需10倍质量浓度备用。取18 mL的MA培养基倒入试管（18times;180mm）中，高压灭菌后冷却至50-60℃，用移液枪吸取2 mL上述药剂注入试管中，摇匀后倒入灭菌过的培养皿中，制成含毒平板。 采用含毒介质生长速率法[1-3]，用直径为4 mm的打孔器移取培养6 d的较为一致的菌落边缘，接种于经不同药剂处理的含毒培养平板中，每处理重复3次，置于25℃光照培养箱中培养。6d后采用十字交叉法测量菌落生长直径，以加入无菌水的培养基为对照，并求出各种化学药剂的抑菌率。 2结果与分析 2.1 不同PH值对菌落生长的影响 培养基的酸碱度大小对菌落生长影响较大，由从图1可知，在pH值为3~8时，病菌均可生长，其生长适宜pH值为4~6，生长的最适pH值为6。在pH值为5时，培养6d，菌落直径可达71mm。在pH2和pH9时，茶花炭疽病病原菌菌落几乎不生长，说明病原菌喜偏酸环境 2.2温度对菌落生长的影响 图2为在不同温度下培养6天后山茶炭疽病病原菌菌落的平均生长速度，在5℃与35℃时，菌丝生长缓慢，低于5℃和超过35℃时菌丝几乎停止生长。温度对山茶炭疽病菌落生长的影响较大，该菌生长的温度范围为5-35℃，适宜温度为24-30℃之间，最适温度为26℃。 2.3 不同光照条件对菌落生长的影响 由上表可知，病原菌在三种处理中均能生长，并且不同光照条件对菌落生长的影响相差不大。 2.4 病菌的药剂毒力测定 药剂的毒力测定结果表明，50%多菌灵的EC50为28.13mu;g/ml，抑制效果最好，其次为70%甲基托布津，其EC50为32.22mu;g/ml，75%百菌清的EC50为62.09mu;g/ml，其抑制效果最差。 3结论与讨论