HPLC 法测定牛黄镇惊丸中胆红素的含量.docVIP

精品论文 参考文献 HPLC 法测定牛黄镇惊丸中胆红素的含量 王吉华 沈忱（辽宁省辽阳市食品药品检验所 111000） 　　【摘要】目的 建立牛黄镇惊丸中牛黄含量测定的检测方法。方法　采用高效液相色谱法测定牛黄中胆红素的含量。结果　胆红素在 0.009968 ～ 0.4984mu;g 范围内，, 进样量与峰面积线性关系良好（r=0.9999）；平均加样回收率98.4%（RSD=0.9%）。结论　该方法操作简便、结果准确、重现性好，可用于牛黄镇惊丸中牛黄的含量测定。 　　【关键词】 牛黄镇惊丸 牛黄 胆红素 HPLC 　　【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2013）38-0136-02 　　【Abstract】 Objective :To establish an method for the determination of calculus bovis in Niuhuang Zhen Jing pill. Methods: HPLC analysis was used to determine the content of bilirubin in calculus bovis . Results: This method had good linearity in the range of 0.009968 ～ 0.4984mu;g（r=0.9999）;The average recovery was 98.4%（RSD=0.9%）.Conclusion: The method was shown to be convenient, accurate with good repeatability, so it was suitable to determine the content of Calculus bovis in Niu huang Zhen Jing pill. 　　【Key words】 Niuhuang Zhen Jing pill Calculus Bovis Bilirubin HPLC 　　牛黄为牛科动物牛的干燥胆结石，具有清心、豁痰、开窍、凉肝、息风、解毒的功效，属于贵细药材。现我国牛黄分为天然牛黄、体外培育牛黄、人工牛黄，大部分药品制剂中使用的均为人工牛黄。天然牛黄仅在极少中成药中使用，牛黄镇惊丸配方中使用的就为天然牛黄。牛黄镇惊丸质量标准为《中国药典》2010 年版第一增补本，未对处方中牛黄质量进行控制。为保障其质量，本文采用HPLC 法定量检测牛黄中胆红素含量， 专属性强，精密度和重复性好。 　　1 仪器与试剂 　　1.1 仪器 　　色谱仪：高效液相色谱仪（日本岛津公司）包括L C -10A T v p 输液泵，S P D 10A v p 可变波长紫外检测器，TA -130 柱温箱， ANASTAR 色谱数据处理系统；BP211-D 电子天平。 　　1.2 试药 　　乙腈为色谱纯，三氯甲烷、甲醇、磷酸、醋酸为分析纯，胆红素对照品（批号100077-200805，含量为98.5%）由中国食品药品检定研究院提供。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱操作条件及系统适用性 　　采用色谱柱：Di m a m o s i l C18 5mu;250times;4.6mm，流动相为乙腈-1% 醋酸溶液（95:5），流速为1.0ml/min，检测波长450nm，进样量为5mu;l；理论板数按胆红素峰计算应不低于7000。 　　2.2. 溶液的制备（避光操作） 　　2.2.1 样品溶液配制：取样品适量，剪碎，混匀，取约0.15g， 精密称定置具塞锥形瓶中，精密加入三氯甲烷- 甲醇- 磷酸（75：25: 0.18）混合溶液25m l，密塞，称定重量，超声处理（功率200W, 频率40K H z）20m i n，冷却至室温，再称定重量，用上述混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 　　2.2.2 对照品溶液配制：取胆红素对照品约适量, 精密称定，加三氯甲烷制成每1 ml 含20mu;g 的溶液，即得。 　　2.3 线性关系考察 　　精密称取胆红素对照品20.24m g 置100m l 棕色量瓶中，加三氯甲烷溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备溶液。 　　精密量取对照品储备溶液0.1、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml， 分别置于10ml 棕色量瓶中，加三氯甲烷稀释至刻度，摇匀。按上述色谱条件，记录色谱图，以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，进行线性回归分析，回归方程为Y=6E+06X-1864.6,r=0.9999(n=7)，表明胆红素在0.009968 ～ 0.4984mu;g 范围内，线性关系良好。 　　3.讨论 　　3.1 供