VEGFrhBMP-2AACB复合物修复兔股骨头缺损坏死的实验研究.docVIP

精品论文 参考文献 VEGFrhBMP-2AACB复合物修复兔股骨头缺损坏死的实验研究 曲志强 陈微微 刘海霞 魏东岩 刘思佳 杜鹏（内蒙古通辽市医院 内蒙古通辽 028000） 【中图分类号】R681 【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）07-0135-01 股骨头缺血性坏死(ANFH)作为临床上常见的骨科疾病，其治疗一直是国内外的一大难题。骨形态发生蛋白和碱性成纤维细胞生长因子是近来研究较深入的两种骨生长因子。VEGF是机体内促进血管生长最重要的生长因子。研究表明VEGF对软骨内成骨及骨折愈合过程中的血管增生发挥着重要作用。我们通过液氮冷冻法建立兔股骨头缺损坏死模型，采用VEGF/rhBMP-2/AACB复合物植入,评价其修复ANFH的成骨和成血管能力及临床应用的可能性。 1 材料与方法 1.1 材料rhBMP-2和VEGF(购自Sigma公司) 1.2 AACB的制备：取五月-六月龄兔椎体松质骨，1:1氯仿/甲醇脱脂12小时，30%双氧水脱蛋白48小时，盐酸部分脱钙2分钟，冷冻干燥24小时，置4 摄氏度冰箱保存。 1.3 实验动物 健康成年新西兰家兔五月-六月龄，购买于广东省实验动物中心, 体重2.5kg-5kg。 1.4 AACB与rhBMP_2、VEGF复合物的制备 将rhBMP-2溶于溶于盐酸胍溶液中匀桨后，透析48小时，再将VEGF(购自Sigma公司),按适当比例加入上述液体中充分混匀。将AACB与含VEGF、rhBMP-2的固化液按固液比mp/vl=4g：1ml在玛瑙研钵中充分调和成糊状,制成直径10mm*4mm*4mm的长方体片,每片含rhBMP-2 400ug、VEGF60ng 。 1.5 试验动物分组 健康成年新西兰大白兔30只,体重2.5～3.5kg,雌雄不限,60侧股骨头坏死模型按随机化原则分为5组, A组为空白对照组, B组单纯植入AACB，C组植入rhBMP-2/AACB,D组植入VEGF/rhBMP-2/AACB，E组植入自体松质骨。 2 观察和检测指标 2.1 大体观察：术后观察动物饮食、活动及切口情况。取材后观察股骨头有无塌陷变形。再沿股骨头冠状面剖开，肉眼观察原缺损区修复情况。 2.2 取材后摄x-ray片（条件为70mA,60kV)，观察原缺损区的骨修复和骨连接情况。 2.3 生物力学测定：在12周时取材的原缺损区取下约1cm*1cm*1cm的样品，采用日本岛津电子式万能材料试验机进行抗压强度和抗弯强度检测。 3 统计学分析 所有数据采用SPSS11.5统计软件包进行分析处理，采用方差分析，plt;0.05为差异有显著性意义。 4 结果 4.1 大体结果 所有动物术后当天开始进食，切口无感染，一期愈合，无动物死亡。所有股骨头未发生脱位、塌陷及股骨颈骨折。A组12周时缺损区主要为结缔组织充填，缺损清晰可见。B组12周时移植区可见新生的稀疏骨组织。C组6周时移植区可见新生骨组织，C组12周时骨改建不良。D组3周时肉芽组织就生长活跃，移植物6周完全吸收，大量新骨形成。12周时骨改建接近正常。E组移植物6周时也已完全吸收，有中等量新骨形成，12周时骨改建接近正常。 4.2 x-ray片表现 3周时A组缺损清晰可见，缺损区未见骨质形成，其余各组骨移植区密度低于周围骨组织。6周时A组缺损仍清晰可见，其余各组移植材料与宿主骨分界模糊。12周时A组缺损仍然存在,B组骨移植区密度低于周围骨组织，C组骨移植区密度不均,D、E组与宿主骨密度相当，分界不清。 4.3 生物力学测试 A组抗压强度和抗弯强度都最小（7.06plusmn;0.23）、7.46plusmn;2.02）,余其余各组间差异具有显著意义。B组42.69plusmn;1.69Mpa, 49.45plusmn;1.09）C组55.68plusmn;1.51Mpa，71.34plusmn;5.5Mpa）抗压强度和抗弯强度不及D组66.34plusmn;6.81Mpa, 84.59plusmn;3.59Ma）和E组（68.11plusmn;4.09Mpa,85.99plusmn;2.40Mpa),差异有显著性意义（Plt;0.05),D组和E组间差异无显著性意义（Pgt;0.05)。 5 讨论 VEGF是机体内促进血