乙型肝炎病毒基因突变与其血清标志物的特殊模式.docVIP

精品论文 参考文献 乙型肝炎病毒基因突变与其血清标志物的特殊模式 薛漓 喻海忠（江苏省南通市中医院检验科 江苏南通 226001） 【摘要】 乙型肝炎病毒在一定的选择压力下，由于其具有的一些特征，导致它比其他DNA病毒更易出现变异。前C区和基本核心启动子(BCP)的变异可产生HBeAg阴性变异株；前S／S区的基因变异可导致HBsAg的漏检；这些原因导致了HBsAg和抗-HBs同时出现，HBeAg和抗-HBe同时阳性等特殊模式的出现。 【关键词】 乙型肝炎病毒 变异 特殊模式 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）15-0354-02 乙型肝炎(简称乙肝)主要通过输血、注射和母婴传播。此病在我国广泛流行，人群感染率达60％，HBsAg阳性率达10％—15％，是当前危害人民健康最严重的传染病。携带者以男性居多，其原因未明。医院常规检测的血清HBV标志物俗称乙肝两对半。近几年许多治疗乙型肝炎病毒的药物，如干扰素、抗乙肝核糖核酸、拉米呋啶等，这些药物的联合应用使体内氨基酸残基变异，出现了许多不同形式。 1 HBV病毒常见的几种特殊模式 1.1 HBsAg和HBsAb同时存在、HbsAg的假阴性 出现HBsAg和HBsAb同时阳性的原因可能是由于HBV感染恢复期所形成的HBsAg-抗HBs免疫复合物[1],但更多的可能由于不同亚型的HBV重叠感染[2]或HBV基因发生了变异，特别是HBV-S基因发生了变异。前S基因的缺失突变与肝炎的进展程度有关，与BCP基因突变共同存在时更易使肝病恶化，在进展性肝病中更容易出现前S基因的缺失突变。缺失往往发生在前Sl的3rsquo;端和前S2的5rsquo;端，前S基因的缺失突变对S基因启动子会造成影响。S基因变异可导致隐匿性HBV感染，表现为血清HBsAg阴性，但仍可有HBV低水平复制。 常见的G145R突变可以影响S抗原的分泌和稳定性，导致循环病毒量的低水平。研究表明S基因在“a”决定簇中发生的突变主要在氨基酸位点：F／Y134、M133、D144和G145，这些HBs抗原中主要亲水环的改变会改变抗体结合位点，影响免疫反应和诊断分析，使之成为免疫逃避突变株。 拉米夫定治疗中HBsAg血清学清除可能不预示着病毒的清除，很可能是由S基因点突变引起的，导致HBsAg与抗HBs抗体结合能力的减弱和检测的失败。 1.2 HBeAg和HBeAb同时出现、HbeAg的假阴性 HBeAb常出现在HBeAg转阴后，两者同时阳性较少见。前C区和基本核心启动子(BCP)的变异可产生HBeAg阴性变异株。前C区最常见的变异为G1896A点突变，形成终止密码子(TAG)，不表达HBeAg。BCP区最常见的变异是A1762T／G1764A联合点突变，选择性地抑制前C mRNA的转录，降低HBeAg合成。慢性乙型肝炎患者中可出现前C区缺失突变引入终止密码子，使变种不能产生HBeAg。 在病毒复制活跃的个体中，通过病毒前C区和基本核心启动子(BCP)的变异引起的HBeAg分泌合成减少，可以发生HBeAg阴转，但并不代表病毒复制处于低水平。 1.3 HBV P区的基因突变 P基因变异主要见于POL／RT基因片段。在拉米夫定治疗中，最常见的是酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸(YMDD)变异，即由YMDD变异为YIDD(rtM204I)或YVDD(rtM204V)，并常伴有rtLl80M变异，且受药物选择而逐渐成为对拉米夫定耐药的优势株。 1.4 HBV X区的基因突变 X基因的变异与肝脏癌变形成相关，在HBV相关性肝细胞癌的分子发病机理中起重要作用。X基因表达HBV调控蛋白HBx，作为反式作用因子可调节许多转录因子，HBx在刺激HBV转录和复制的过程中起重要作用，它对转录的反式作用功能在HBV复制中是关键的。 2 检测方法 核酸序列测定是确认点突变和缺失突变的金标准，其他分子诊断方法仅能检测到特异于探针或引物的突变。测序分析耗时而且昂贵，但它可以提供最大的信息量，尤其对于那些还没有提供序列信息的突变株。序列测定最大的缺陷是检测基因组准种的相对不敏感，只能检出含量大于10％的突变株。相对敏感的检测突变的方法包括有限稀释克隆法PCR(LDC.PCR)、缺口连接酶链反应(gLCR)、实时PCR和熔解曲线分析等，可用于基于临床和实验室