乙肝病毒基因分型、耐药突变基因检测与临床.docVIP

精品论文 参考文献 乙肝病毒基因分型、耐药突变基因检测与临床 赵建平 　　（泰兴市第二人民医院检验科 225411） 　　【摘要】目的:通过对地区慢性乙型肝炎患者HBV病毒基因分型、耐药突变基因的检测，明确其基因型，确认患者是否耐药，从而指导临床抗病毒治疗。方法:采用荧光定量PCR和基因芯片反向斑点杂交技术检测102例慢性乙型肝炎患者血清HBV基因型和耐药突变基因型。结果:102例慢性乙型肝炎患者中（1）血清HBVDNA定量为（4.5plusmn;2.3）times;103～（5.8plusmn;1.5）times;108copies/ml（2）HBV基因型C型77例占77.5％，B型24例占23.5％，D型1例约占1％（3）其中79例未采取过核苷（酸）类药物抗病毒治疗的患者未出现耐药，23例使用过核苷（酸）类药物抗病毒治疗一个疗程以上的，耐药突变点变异为M204V/I型的13例，L180M型的为5例，L180M+M204VI的为5例，未检出其他突变基因型。23例耐药基因型中HBV-C基因型占20例，3例为HBV-B基因型。结论:本地区HBV基因型以C型为主，核苷（酸）类药物抗病毒治疗过程中HBV-C基因型容易发生基因突变而耐药，且以M204V/I突变型为主。检测HBV基因型和耐药突变型是指导临床抗病毒治疗的重要指标。 　　【关键词】HBVDNA HBV基因型 耐药基因 　　【中图分类号】R512.6+1 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2014）18-0208-02 　　1.资料与方法 　　1.1 一般资料 病例选择2011年6月－2013年6月在本院检测的102例血清HBSAG（+）,HBVDNA定量为（4.5plusmn;2.3）times;103～（5.8plusmn;1.5）times;108copies/ml的慢性乙型肝炎患者，慢性乙型肝炎的诊断依照《病毒性肝炎诊断标准》[1]。其中男性为74例，女性为29例，年龄为18～59周岁。留取血清标本作基因分型，耐药突变基因检测。（102例慢性乙型肝炎患者中23例采取过核苷（酸）类药物抗病毒治疗一个疗程以上） 　　1.2 方法 　　1.2.1 标本采集 采集慢性乙型肝炎患者空腹不抗凝静脉血3ml,3000r/min离心10min分离出血清检测。 　　1.2.2 试剂 荧光定量PCR检测采用上海科华公司试剂盒具体操作按说明书。基因芯片反向斑点杂交技术检测采用深圳亚能生物技术有限公司产品具体操作按说明书。 　　1.2.3 仪器 SLAN PCR荧光定量扩增仪、YN-H16分子杂交仪。 　　2.结果 　　2.1 102例慢性乙型肝炎患者HBVDNA定量为（4.5plusmn;2.3）times;103～（5.8plusmn;1.5）times;108copies/ml。 　　2.2 HBV基因分型检测102例慢性乙型肝炎患者中C基因型77例占77.5％,B基因型24例占23.5％，D基因型1例约占1％，未检出C、B、D型以外的基因型。 　　2.3 102例慢性乙型肝炎患者中未采用过核苷（酸）类药物抗病毒治疗的79例患者，耐药突变基因检测均表现为敏感型，23例使用过核苷（酸）类药物抗病毒治疗一个疗程以上的（HBVDNA定量检测都曾出现过比治疗前不同程度的下降，现在HBVDNA定量检测结果都出现了反弹且有明显复发的临床症状），耐药突变点变异为M204V/I型13例，L180M型的为5例，L180M+M204VI的为5例，23例耐药基因型中HBV-C基因型占20例，3例为HBV-B基因型，未检出其他突变基因型。见表-1 　　23例核苷（酸）类药物耐药突变基因型 　　3.讨论 　　乙型肝炎是全球广泛分布的传染病，我国属于乙型肝炎病HBV感染的高发区，自1988年OKAMOTO[2]等比较18株不同血清型的HBV DNA全序列，将HBV分为A-D基因型，Norder将HBV分为A-F基因型，目前HBV可分为A-H基因型。HBV基因型存在明显的地域性差异，在我国主要以B、C、D型为主，存在南北和民族差异。南方以B型为主，北方以C型多见，汉族以B、C型为主，D型少见，少数民族可见一定比例的A、D型[3]。本文资料显示，本地区可见B、C、D 型，且以C型为主且C型乙型肝炎患者在抗病毒治疗过程中易出现耐药，耐药位点为M204V/I、L180M 和L180M+M204VI。这可能与本医院医生习惯对所有乙型肝炎的病患首先使用拉米夫定抗病毒治疗有关。当患者体内出现HBV耐药基因突变时，临床症状迁延且病情反复，应考虑调整用药。检测HBV基因型和耐药基因有助于指导