5-生化分析携带污染的发现与排除.pptxVIP

生化分析携带污染的发现与排除 携带污染的来源测试项目A试剂针，比色杯等试剂成分残留干扰下一个测试项目B引起携带污染的原因原因一 生化仪的发展变化：①、多项目，多样本处理， ②、处理能力的提高（高速化） 共有化：①、样本针，试剂针；②、比色杯；③、搅拌棒携带污染原因二 生化仪状态不良，使用不当： ①、清洗力的低下（日常维护欠缺，仪器老化） ②、生化仪内污垢的积聚 ③、测试顺序安排不当常规清洗不能有效的消除污染携带污染主要内容试剂针携带污染1样本针携带污染2比色杯携带污染3搅拌棒携带污染4携带污染的消除5一、试剂针携带污染原因一 全自动生化分析仪一般采用双试剂针，即所有项目的一试剂都共用试剂针R1，所有项目的二试剂都共用试剂针R2。试剂针R1或R2在每吸取一次试剂后都会进行一次清洗，之后会立即吸取下一个项目的试剂。 当自身清洗能力下降，试剂针在吸取试剂时会将部分残留的前项目试剂成分带入到后项目反应杯中，对后项目的检测结果造成影响。 原因二 从各个项目设置的参数可知，试剂体积量远大于样本体积量。 因此试剂针携带污染影响程度会高于样本针携带污染。 试剂针携带污染的类型1、试剂成分间的直接影响 试剂中含有下一个检测所要测定的底物，或是含有的某种试剂成分与下一反应的底物有作用，因而直接干扰下一反应的测定结果。2、试剂成分间的间接影响 前一个测定试剂与后一个测定试剂反应原理相近，或者都会通过相同的中间产物。该试剂所引导的反应对下一个项目的反应进程带来间接的干扰，因为在有试剂污染的情况下，下一个测试所测定的是前后两个项目反应的综合作用结果。 部分常用试剂间可能产生的干扰如下：1.pH值改变：试剂中反应缓冲液之间因仪器携带污染而使下一反应的pH值改变，使下一反应达不到最佳状态。如双缩脲法测血清总蛋白，若其他条件相同，反应在碱性(pH值8-9)条件时，蛋白肽键（—CONH）才都能与碱性铜溶液作用生成紫色反应，完全测出血清蛋白的总量。若pH＜8时，总蛋白测定结果偏低，直接影响球蛋白、白蛋白/球蛋白的结果。酶活力测定在最适pH值时，反应最快，灵敏度最高，但是因为缓冲能力有限，可因携带污染使酶促反应出现无效值。大多数酶反应pH值在6.0-7.5之间；ALP、γ-GT、LDH须在碱性条件下最适宜。 2.TG、T-CH、UA、MG试剂中含有胆酸盐，对循环酶法测定胆汁酸能产生严重干扰。3.ALT（IFCC）、AST（IFCC）试剂中含有高活力LD成分，有可能会对LD的测定带来干扰。4.CK（NAC-activated）、CK-MB（NAC-activated）试剂中含有Glu成分，其分析方法的原理中包含Glu的已糖激酶(HK)反应过程，因此可能对Glu测定带来干扰，尤其对Glu的HK法测定可能带来严重干扰。 5.Glu(HK)、CK（NAC-activated）、CK-MB（NAC-activated）、TG、HDL-C、LDL-C(直接法)等试剂中使用了镁盐，可能会对其后的Mg2+ 测定带来干扰；TP试剂中高浓度的Cu2+对Mg2+测定也会产生干扰。 6.ChE(Butyrylthiocholine)、TC(ChOD-PAP)、Glu(GOD-PAP)、 UA(Uricase)、 α-HBDH(DGKC)等试剂使用磷酸缓冲液，可能会对无机磷的测定带来干扰。 7.Mg2+试剂 (Calmagite)中含有EDTA成分，为Ca2+络合剂，可能对Ca2+的测定带来干扰。8.CK检测不应在ALP、Ca检测之前，因CK反应液中加入EDTA-Na，能抑制ALP活性，结合Ca而使结果偏低。 9.BUN酶法测定因谷氨酸脱氢酶（GLDH）消耗NADH，不能放在底物NADH如ALT、AST项目前检测。 试剂针携带污染排查和发现1、思路 目前绝大部分实验室开展的生化检测项目至少都在20项以上，评价全部项目之间的携带污染会非常耗时，并且试剂成本消耗量大。且不同仪器的动作原理不完全相同，设计一个较为简单、合理的实验方法是需要重点考虑的内容。 2、原理 通过设置特定的标本检测顺序，每个样本只做一个项目的检测，可以控制不同项目的先后吸取顺序，实现任何一个项目都能与其他项目相遇。 为了有效评价项目之间携带污染影响程度，污染实验所用的病人样本的混合血清应尽量包含医学决定水平浓度。 试剂针携带污染实验方法一1、携带污染初实验 假设本次实验以A、B、C、D、E五个项目来考察各个项目之间的试剂针携带污染。 先在生化仪中输入样本测试号码和选择项目，每个样本号码只选择一个项目，目的是使试剂针吸取项目的顺序完全按照样本测试号码的选后顺序进行，五个项目的测试顺序表见表1。测试完成后，将数据输入到处理表格2和表格3中，按照判断标准，寻找可能存在的污染项目组合。 表1测试项目数为5时测试顺序