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- 2017-12-28 发布于江苏
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蛋白检测ELISA
蛋白质检测-ELISA;1. ELISA的原理
2. ELISA的类型
3. 试剂准备:免疫吸附剂
结合物
酶底物的准备
4. 对照设定
5. 标本的采取和保存
6. 结果判断 ; 酶联免疫吸附ELISA(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA IA)。基础:抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记,加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,由此进行定性或定量分析。;;1.1 抗原抗体反应 ;1.1.3 最适比例 ;1.1.4 敏感性;1.4 免疫测定在病虫害检测中的应用
由于各种抗原成份(如病毒的外壳蛋白、细菌的细胞壁蛋白组分和鞭毛等),包括小分子的半抗原(包括植物激素、化学农药等),均可用以制备特异性的抗血清或单克隆抗体,利用此抗体作为试剂就可检测标本中相应的抗原,因此免疫测定的应用范围极广。;2 ELISA的类型;2.2.1 双抗体夹心法测抗原;操作步骤如下:
(1)将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。
(2)加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。
(3)加酶标抗体:使固相免疫复合物上的抗原与酶标
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