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ADSCs移植治疗STZ诱导的SD大鼠1型糖尿病肾病研究 大鼠经注射后,血尿生化指标发生明显改变,符合模型标准。 细胞移植后检测发现,能改善肾功的生化指标,并修复肾组织的病理 改变,口对其改善并不明显。和都能下调血糖水平,增加胰岛素 分泌量。能降低氧化应激产物和蛋白质羰基含量,下调和 的表达。减少炎症因子的分泌,抑制通路的激活。而不能 抑制通路,对氧化应激及炎症反应没有明显改善。 结 论 .采用型胶原酶消化法成功培养,稳定增殖,表达间充质干细胞相 关的表面抗原,具有成骨、成软骨和成脂肪的多向分化潜能。 .尼克酰胺、活化素和.能成功诱导分化为有功能的。 .可以迁移到大鼠的肾组织内,修复坏死的肾组织、改善肾功能。 抑制应激和炎症反应,延缓和逆转的发生发展。 .仅能增大鼠胰岛素的分泌量,降低血糖水平,而对于肾组织的保 护和治疗作用不明显。 关键词 脂肪干细胞,糖尿病肾病,胰岛素分泌细胞,细胞治疗 ?英文论著摘要 , . .%% . . ,. . . ,, . . , , 弘 . . ?’ . ,, . ’ . . .. . ?.. , ..’ .. ,. . , , , . . .. . . . ... . . .. .. , ... .. :. .. . ., , , . . , . . .. . .. ,, , ,, ?,, , , ,, , , ,、 哲 ,?, , ,一,., 一,、一、一 , 、一仅 , . . .. : .. . ,,, , . ,, . ... :, . ?. . . . 一. . . . , . .. . . , . .,, . ., , . .. . . . . , ? . .? .. .,, . . . . . . . . .,, , . . ., ,. ,.., .. . . . , , . . ’. , , , ?英文缩略语论文一? 大鼠脂肪干细胞的培养与鉴定 刖 舌 种子细胞是组织工程学最关键的要素,是修复组织缺损物质的产生工具,也 是生命功能活动的执行者【。从来源上可将种子细胞划分为自体细胞、同种异体 细胞和异种细胞;从分化程度上则可以划分为胚胎干细胞、成体干细胞和分化成 熟细胞。同种异体细胞和异种细胞虽然来源较为广泛,但存在免疫排斥和细胞功 能差异等问题。胚胎干细胞很难定向分化,又涉及伦理学问题】。分化成熟细胞 存在数量有限、增殖能力差、易老化等不足【】。而自体来源的成体干细胞具有明 显的优势,其具有自我更新、定向分化及免疫调节能力,目前成功活跃在组织构 建、器官修复和细胞治疗等领埘钔。 年等【】从人吸脂术后的无菌脂肪组织中分离培养出具有多向分化潜 能的细胞,研究发现此类细胞具有一般干细胞的生物学特性,命名为脂肪源性干,。脂肪组织储备丰富,单位体积组织内 细胞 干细胞含量大,取材安全、痛苦小,培养扩增方法简单、成本低,细胞增殖能力 强,可以自体取材,不涉及伦理学问题,由于具有这些独特优势已成为目 前研究的热点。 脂肪组织分布广泛,不同部位的脂肪组织中提取的也不尽相同。 等【】发现大鼠附睾区的脂肪组织干细胞含量丰富,具有腹股沟区皮下脂肪组织 的生物学特性。掣】从人眼睑的脂肪组织中也分离培养出了, 发现眼睑的具有干细胞特性,同时还特异性表达神经元相关的标记物。但 两者都存在取材受限,缺少临床应用价值的问题。腹部是脂肪组织存在的主要场 所,又分为腹壁皮下脂肪和内脏脂肪两种。比较两者的研究表明,皮下脂肪组织 含量大,增殖能力强,不易老化,而在分化能力上两者没有明显差别【。 由于腹壁皮下脂肪组织来源的具有实际的应用性,取材方便无危险性,具 有明显的干细胞生物学特性,应用广泛,增殖能力强。因此其作为的代表, 广泛应用在组织工程和细胞治疗领域。 但目前关于的原代分离培养方法尚无定论,型胶原酶消化法得到广 泛的应用,但型胶原酶的浓度和具体的消化方法还不是很明确。原代培养得到 的并非单一,而是混有其他细胞的细胞群,其纯化方法还没统一。而且 尚缺乏特异性的鉴定标准,只能通过某种生物学特性对其进行评价【】。 本实验拟分离大鼠腹股沟区的皮下脂肪组织,采用型胶原酶消化法, 培养扩增,观察细胞形态及生长情况、法检测细胞增殖能力,流式细 胞术分析细胞周期及表面抗原的表达,通过向成骨、成软骨、成脂肪诱导培养, 观察其多向分化潜能。综合的生物学特性,探讨原代培养的有效 方法,以期为干细胞移植治疗疾病或构建组织工程器官提供大量的种子细胞。 实验材料与方法 一、实验材料 一实验动物 健康清洁级大鼠只,体质量,雌雄不限,由中国医科大学实 验动物中心提供。 二主要试剂 低糖、胎牛血清,?、.、.、.、 一单克隆抗体,型胶原酶、胰蛋白酶、