细胞中DNA、RNA的显示.pptVIP

实验九 细胞中DNA、RNA的显示 I. DNA的细胞化学——Feulgen反应 一、实验目的 了解Feulgen反应的原理，掌握有关的操作方法。 二、实验原理 Feulgen反应的原理是根据DNA经1mol/L弱酸水解后，打开嘌呤和脱氧核糖连接的键，在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。这些醛基就在原位与Schiff试剂结合，形成含醌基的化合物，醌基是一个发色团所以具有颜色，因此凡有DNA的部位，就呈现紫红色。 三、实验仪器、材料和试剂 1、仪器、用具 显微镜、恒温水浴箱、温度计、解剖针、试管、烧杯、载玻片、盖玻片、吸水纸。 2、 材料 洋葱鳞茎 3、试剂 1N 盐酸 Schiff试剂 亚硫酸水 用镊子撕洋葱鳞茎内表皮 ↓ 1mol/L HCl 1ml←蒸馏水（对照组） ↓ 60 ℃，8-10分钟 蒸馏水水洗 ↓ Schiff试剂1ml遮光染色30分钟 ↓ 新鲜配制的亚硫酸水1ml洗3次，每次2分钟 ↓ 蒸馏水水洗5分钟 ↓ 将染色后的鳞茎内表皮制片 ↓ 镜检 四、实验步骤 五、作业 1.简述Feulgen反应的原理和实验的关键步骤。 2.绘图示洋葱鳞茎表皮细胞DNA的分布部位。 II. RNA的细胞化学——Brachet反应 一、实验目的 了解Brachet反应的原理，掌握有关的操作方法。 二、实验原理 甲基绿—派洛宁（Methyl green-Pyronin）为碱性染料，它能分别与细胞内的DNA、RNA结合而呈现不同颜色。当甲基绿与派洛宁作为混合染料时，甲基绿和染色质中DNA选择性结合显示绿色或蓝色；派洛宁与核仁、细胞质中的RNA选择结合显示红色。其原因可能是两种染料的混合染液中有竞争作用，同时两种核酸分子都是多聚体，而其聚合程度有所不同。