重组鸡痘病毒rFPVHN对结肠癌细胞HCT8抑制机制的研究.pdfVIP

第六次全国会员代表大会暨第11故学术研讨会 (一种库蚊)既叮咬人又叮咬牛，．是家畜和人间的传播媒介。研究发现，传播病毒的蚊种常随地区变迁而 不同。病蚊一次产下无数的卵，在干旱气候下能够保存数年之久，不但延续了病毒的生存，在雨季孵化的 病蚊新生代也常成为可怕的病毒带原体．该病主要流行于非洲，但WHO警告旅游业的发展使之有可能传 播至各地删。2000年在沙特阿拉伯的流行，说明该病已传到亚洲[221。 7小结 目前虽然我国蚊媒传染病仅主要有流行性乙型脑炎、登革热，但随着对外贸易的扩大。旅游业的发展， 我国与越来越多的国家建立了贸易关系，这就增加了其他国家的蚊媒传染病向我国传插的危险。如三十年 代源自非洲岢亚裂谷地区的裂谷热，至九十年代已蔓延至整个非洲大陆，2001年进一步越过红海，延伸至 阿拉伯半岛，专家担心将进一步威胁亚洲及欧洲：又如自文伊蚊在80年代通过旧轮胎贸易由东南亚和亚 洲扩散到美国、墨西哥、巴西等地；又由于不同地区蚊种的多样性，避免不了蚊种间的交配繁殖，导致不 同蚊种或亲缘关系相近的蚊种水平传播(交配)及垂直传播(经卵)病毒病等疾病，这样就形成了传播同 种疾病蚊种的多样性，同时说明了不同时间调查同一蚊煤疾病，蚊媒不同的情况：近年又由于厄尔尼诺等 因素，全球气温变暖，一些热带蚊煤疾病向我国发出了警告，同时我国一些蚊煤疾病随蚊虫的北移而向内 陆深入。因此我们要时亥0注意蚊虫分布及其传播的疾病，及时预防控制，消灭蚊媒；在对外贸易方面，运 输工具要加强消毒、灭蚊等措施，预防蚊媒等虫媒疾病。 参考文献略 李霄1金宁一1米志强l连海1管国芳1孙丽丽1张敬敏l粱代清2夏学功2 检测细胞活性；采用吖啶橙，溴化乙锭(AO／EB)染色观察肿瘤细胞死亡方式；通过DCFA染色及罗丹明 flow 123染色结合流式细胞仪(the 细胞感染rFPVHN后，死亡率达56．8％；膜整合性丧失，染色质凝聚；细胞内活性氧水平升高，线粒体跨 细胞凋亡。 主题词重组鸡痘病毒；新城疫病毒HN基因；结肠癌；细胞凋亡 disease 近年来新城疫病毒(Newcastle virus，NDV)等溶瘤性病毒作为潜在的抑瘤制剂受到广泛关注 过程中起关键作用；其胞外结构域具有血凝素活性(HA)和神经氨酸酶活性(NA)，可水解宿主细胞表面 类细胞中复制，感染哺乳动物后虽病毒基因可以表达，但却不能装配成有感染能力的子代病毒粒子。这些 特征使鸡痘病毒作为安全的非复制型病毒载体广泛的应用于各类疫苗研究14。l。为研究携带HN基因的重 组鸡痘病毒对肿瘤的抑制作用及机制，本研究探讨了其对结肠癌细胞HCT-8的杀伤比例，并在此基础上阐 述了抑瘤途径。 112l 其他论文 1材料与方法 1．1主要材料与仪器 产品；荧光显微镜为oLYMPuS公司产品；流式细胞仪为美国B—D公司产品。 1．2细胞培养及病毒感染 5％C02条件下．培养至对数生长期，用0．25％N蛋白酶消化，制备单细胞悬液，细胞计数并凋整细胞浓度 分别以100MOI(Moltiplicity rFPVHN感染，同时设未经处理的HcT-8肿瘤细胞对照组。每组设3个复孔。 1．3 mT染色法检测 液，每孔加入DMSO200山。充分溶解后，用酶标仪(M90nm)检测OD值，根据下式计算病毒对HcT-8 细胞的杀伤率： 杀伤率=【(对照孔平均OD值一实验孔平均OD值)+对照孔平均OD值Ixl00％ 1．4 AO／EB染色 有滤光片、40倍物镜的荧光显微镜观察。 1．5 PI染色检测细胞凋亡率 PBS重悬，加PI染液(PI 1．0％，NaCl 通透性．离心收集经固定的细胞，并用300p,l 100pg／mL，TritonX．100 min。用FCM检测，激发光波长为488nm。 0．9％)，使PI终浓度为50p,g／m1．4。C避光染色30 1．6罗丹明123染色检测线粒体跨膜电位变化 色30rain，PBS洗涤3次