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皮肤真菌检查技术

(二)检验方法: 1.直接镜检:直接采取病变部位的标本,用显微镜检查有无菌丝及孢子的存在,本法迅速简便,是临床真菌检查最常用的方法 2.分离培养: 取毛发、皮屑、甲屑等标本,用70%乙醇消毒,接种沙保氏琼脂斜面培养基,25℃培养7~14天,根据菌落形态及颜色、并挑取菌落镜检菌丝及孢子的特征进行鉴定。 毛癣菌属 小孢子菌属 表皮癣菌属 3.荧光检查:本法主要用于头癣检查。病发在滤过紫外灯照射下可发出不同色泽的荧光,如黄癣菌病发呈暗绿色荧光,白癣小孢子菌属的病发呈亮绿色荧光等。 第三部分 深部感染真菌 深部真菌是侵犯皮下组织和内脏,引起全身性感染的真菌。 多数能引起慢性肉芽肿样炎症、溃疡及坏死等病变 深部感染真菌分两大类: 1. 致病性真菌: 此类真菌在正常人体内部不存在,一旦侵入机体,即可致病,如组织胞浆菌、球孢子菌、芽生菌等,属外源性,我国少见; 2. 条件致病性真菌: 是人体正常菌群的成员,当机体抵抗力下降时才致病,如新型隐球菌、白色念珠菌、曲霉菌和毛霉菌等。 一、白色念珠菌 白色念珠菌(canidia Albicans)又称白色假丝酵母菌,广泛存在于自然界,也存在于正常人口腔,上呼吸道,肠道及阴道,一般在正常机体中数量少,不引起疾病 。 为条件致病性真菌。 (一)生物学特性 卵圆形,大小2μm×4μm,革兰氏染色阳性。 有假菌丝。 培养特性:典型类酵母型菌落,表面光滑,呈灰白色或奶油色,有酵母气味。 涂片镜检,可看到表层为卵圆形芽生细胞,底层有较多假菌丝。 病原性真菌检验 河北省望都皮肤病防治院 张维娜 真菌(Fungus) 具有典型细胞结构(细胞核、细胞器、细胞壁) 细胞壁含几丁质和(或)纤维素 无根、茎、叶,不含叶绿素 以腐生或寄生方式摄取养料 能进行有性生殖和(或)无性繁殖 第一部分 病原性真菌概述 对人类致病的真菌分为: 浅部真菌:侵犯皮肤、毛发、指甲,为慢性,对        治疗有顽固性,但影响身体较小, 深部真菌:可侵犯全身内脏,严重的可引起死亡。   此外有些真菌寄生于粮食、饲料、食品中,能产生毒素引起中毒性真菌病。 一、生物学性状 (一)形态结构 真菌细胞结构比细菌复杂 细胞壁为几丁质(Chitin)(多聚N-乙酰葡萄糖组成),并含葡聚糖,甘露聚糖及蛋白质,某些酵母菌还含类脂体。 细胞内有较为典型的核结构和细胞器。 真菌形态分单细胞和多细胞两类 单细胞真菌主要为酵母和类酵母菌(如隐球菌、念珠菌),呈圆形或椭圆形。以出芽方式繁殖。 多细胞真菌由菌丝和孢子组成 菌丝分枝交织成团,形成菌丝体(Mycelium),并长有各种孢子,这类真菌即一般称为霉菌(Mold)。 由于生活环境(如营养、温度、氧气等)的改变,有些真菌的孢子与菌丝两种形态可以互变,这类真菌称为二相性真菌(dimorphic fungus),如球孢子菌、组织胞浆菌及芽生菌。 真菌的形态构成 菌 丝 营养菌丝 气生菌丝→ 生殖菌丝 孢 子 有性孢子 由同一菌体或不同菌体上的二个细胞融合形成 绝大多数属于非致病性真菌所具有 无 性 孢 子 分生孢子 分生孢子梗的顶端或侧面 大分生孢子 小孢子菌属、 表皮癣菌属 小分生孢子 毛癣菌属 叶状孢子 菌丝细胞直接形成 芽生孢子 隐球菌、念珠菌 关节孢子 厚膜孢子 新型隐球菌 子囊孢子 菌丝末端形成膨大的囊状结构即孢子囊,内含很多孢子 根霉菌 真菌菌丝形态 真菌孢子形态 (二)培养特性 大多数真菌营养要求不高,常用沙保氏培养基 (SDA)培养。 浅部病原性真菌的最适温度为22~28℃,生长缓慢,大多于1~4周出现典型菌落。 深部病原性真菌培养在37℃中生长最好,生长较快,经3-4天即长出菌落。 真菌菌落类型 类型 定义 特征 颜色 举例 酵母型菌落 为单细胞真菌的菌落,形态与一般细菌菌落相似,以出芽形式繁殖 光滑、湿润, 一般为乳白色 新型隐珠菌 类酵母型菌落 外观似酵母菌落,但可见伸入培养基中的假菌丝,由伸长的芽生孢子形成 光滑、湿润, 一般为乳白色 白色念珠菌 丝状菌落 为多细胞真菌的菌落,由许多管状、分枝菌丝体组成 绒毛状、絮状、粉末状、颗粒状、石膏状。 可产生各种色素。 毛癣菌 (三)变异性 真菌易发生变异,在人工培养基中多次传代或孵育过久,可出现形态结构、菌落性状、色素及毒力等改变。 (四)抵抗力 真菌对干燥、阳光、紫外线及一般化学消毒剂有一定的耐受力,但充分暴露于阳光,紫外线及干燥情况下大多数真菌可被杀死,且对2.5%碘酒,10%福尔马林都敏感,一般可用福尔马林薰蒸被真菌感染的房间。 对热敏感,一般60℃1小时可杀

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