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第五节_溶解氧浓度对发酵的影响

* * 第五节 溶解氧浓度对发酵的影响及控制 氧是一种难溶于水的气体。在25℃,1×105Pa条件下,纯氧在水中的溶解度为1.26mmol/L,空气中的氧在纯水中的溶解度更低(0.25mmol/L)。 在28℃氧在在发酵液中的溶解度只有0.22 mmol/L,而发酵液中的大量微生物耗氧迅速(耗氧速率大于25~100 mmol/L.h),因此,供氧对于好氧微生物来说是非常重要的。 在对数生长期,即使发酵液被空气饱和,若此时停止供氧,发酵液中溶氧可在几分钟之内便耗尽。 在好氧深层培养中,氧气的供应往往是发酵能否成功的重要限制因素之一。 一、 溶解氧浓度对发酵的影响 1、描述微生物需氧的物理量 比耗氧速度或呼吸强度(QO2):单位时间内单位体积重量的细胞所消耗的氧气,mmol O2·g菌-1·h-1 耗氧速率(r):单位体积的发酵液在单位时间内的耗氧量。mmol O2·L-1·h-1 。 r= QO2 .X 2、溶解氧浓度对菌体生长和产物形成的影响 CCr: 临界溶氧浓度, 指不影响呼吸所允许的最低溶氧浓度。 CCr QO2 CL 一般对于微生物: CCr: =1~15%饱和浓度 例:酵母 4.6*10-3 mmol.L-1, 1.8% 产黄青霉 2.2*10-2 mmol.L-1, 8.8% 定义:氧饱和度=发酵液中氧的浓度/临界溶氧溶度 所以对于微生物生长,只要控制发酵过程中氧饱和度1. 问题:一般微生物的临界溶氧浓度很小,是不是发酵过程中氧很容易满足。 例:以微生物的摄氧率0.052 mmol O2·L-1·S-1 计, 0.25/0.052=4.8秒 注意:由于产物的形成和菌体最适的生长条件,常常不一样: 头孢菌素 卷须霉素 生长 5% (相对于饱和浓度) 13% 产物 13% 8% 3. 培养过程中细胞耗氧的一般规律 疣孢漆斑霉在分批培养时呼吸强度的变化 培养初期:QO2逐渐增高,x较小。 在对数生长初期:达到(QO2 )m,但此时x较低,γ并不高。 C. 在对数生长后期:达到γm, 此时 QO2 (QO2 )m ,xxm D. 对数生长期末:S↓, OTR↓, QO2 ↓ ,而γ∝(QO2 , x , OTR), 虽然x=xm,但 QO2、 OTR 占主导地位,所以 γ↓ E. 培养后期:S→0,QO2 ↓↓, γ↓↓ 影响微生物耗氧的因素 微生物本身遗传特征的影响,如 k0↑,QO2↓ 培养基的成分和浓度 碳源种类 耗氧速率:油脂或烃类葡萄糖 蔗糖 乳糖 培养基浓度 浓度大, QO2 ↑; 浓度小, QO2↓ 菌龄的影响:一般幼龄菌QO2大,晚龄菌QO2小 影响微生物耗氧的因素 发酵条件的影响 pH值→ 通过酶活来影响耗氧特征; 温度→ 通过酶活及溶氧来影响耗氧特征:T ↑, DO2 ↓? 代谢类型(发酵类型)的影响 若产物通过TCA循环获取,则QO2高,耗氧量大; 若产物通过EMP途径获取,则QO2低,耗氧量小。 二、发酵液溶解氧浓度的控制 1、发酵液中氧的传递方程 C P Pi 气膜 液膜 N:传氧速率 kmol/m2.h kg: 气膜传质系数 kmol/m2.h.atm Kl: 液膜传质系数 m/h C*=P/H, 与气相中氧分压相平衡的液体中氧的浓度 Kl: 以氧浓度为推动力的总传递系数 (m/h) 再令:单位体积的液体中所具有的氧的传递面积为 a (m2/m3) Nv:体积传氧速率 kmol/m3.h Kla: 以(C*-C)为推动力的体积溶氧系数 h-1 2、发酵液中氧的平衡 发酵液中供氧和需氧始终处于一个动态的平衡中 传递: 消耗: r= QO2 .X 氧的平衡最终反映在发酵液中氧的浓度上面 3、供氧的调节 C有一定的工艺要求,所以可以通过Kla 和C*来调节 其中C*=P/H Nv H P Kla 增加C*的办法: ★在通气中掺入纯氧,提高氧分压; ★提高罐压 调节Kla是最常用的方法,kla反映了设备的供氧能力,一般来讲大罐比小罐要好。 45升 1吨 10吨 搅拌速度 250 rpm 120 120 供氧速率 7.6 10.7 20.1 2、影响KLa的因素

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