鸡固有免疫MDA5信号通路相关分子的实时荧光定量PCR检测方法的建立.pdfVIP

鸡固有免疫MDA5信号通路相关分子的 实时荧光定量PCR检测方法的建立术 谢智文，何怡宁，吴翠兰，戴锦龙，韦平，韦天超，磨美兰” (广西大学动物科学技术学院，广西南宁530005) 摘要：固有免疫中的MDA5信号通路是机体识别入侵胞内病原体的重要途径之一，其 中MDA5、LGP2和MAVS在识别入侵病原体、激活固有免疫下游的转录因子、诱导干扰素、各 种细胞因子及炎症因子的产生中发挥重要作用。本研究根据NCBI已发表的鸡MDA5、LGP2 和MAVS基因序列设计引物，构建重组质粒作为标准品，在荧光定量PCR仪上建立标准曲线， 并进行灵敏度、重复性和特异性试验。结果显示，成功建立检测鸡MDA5、LGP2和MAVS mRNA表达的实时荧光定量PCR检测方法，此方法具有快速、特异性强、灵敏度高、线性范围 广、稳定性高的特点，为快速检测和定量分析鸡源MDA5、LGP2和MAVS表达提供技术平台， 也为进一步探究鸡相关疾病的固有免疫机制奠定了技术基础。 关键词：鸡；MDA5；LGP2；MAVS；实时荧光定量PCR ofRealTimeFluorescence PCR MethodforDetection Development Quantitative oftheInnateImmuneMDA5 RelatedMoleculesinChicken| SignalingPathway XIE Meilan” Zhiwen，HE Cuilan，DAI Tianchao，MO Yining，WU Jinlong，WEIPing，WEI ofAnimalScienceand 530005) (College Technology，GuangxiUniversity，Nanning，Guangxi Abstract：MDA5 isan methodfor to intracellular signaling important pathway organismsidentify pathogensinvading ininnate andMAVS a criticalroleinthe immune．Meanwhile，MDA5，LGP2 of play recognition cytoplasmpathogens and the tothe factorswhichthenareactivated．Asa signal result．the transmitting transcription interferon．cytokines and areinduced．Inthe were tothechicken inflammatorycytokines presentstudy，primersdesigned MDA5，