流行我国的弓形虫分离株基因分型及其毒力研究Genotyping and virulence of Toxoplasma gondii isolates in China.pdfVIP

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2018-01-01 发布于山东
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流行我国的弓形虫分离株基因分型及其毒力研究Genotyping and virulence of Toxoplasma gondii isolates in China.pdf

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流行我国的弓形虫分离株基因分型及其毒力研究Genotyping and virulence of Toxoplasma gondii isolates in China

目录中英文缩略词对照表………………………………………………… 1 中文摘要……………………………………………………………… 2 英文摘要……………………………………………………………… 5 1. 前言…………………………… ……………………………………9 2. 材料与方法……………………… …………………………………12 2.1 材料和试剂…………………………………………………… 12 2.1.1 实验动物和虫株……………………………………………12 2.1.2 引物…………………………………………………………13 2.1.3 主要试剂……………………………………………………15 2.1.4 部分试剂的配制……………………………………………15 2.1.5 主要仪器及来源……………………………………………17 2.2 实验方法………………………………………………………18 2.2.1 弓形虫 CAg 检测……………………………………………18 2.2.2 弓形虫 IgM 检测……………………………………………18 2.2.3 弓形虫 IgG 检测……………………………………………19 2.2.4 弓形虫间接血凝试验……………………………………… 20 2.2.5 人源性弓形虫分离…………………………………………20 2.2.6 猫源性弓形虫分离…………………………………………20 2.2.7 弓形虫复苏与冻存………………………………………… 22 2.2.8 弓形虫 DNA 提取………………………………………… 23 2.2.9 弓形虫目的基因扩增……………………………………… 25 2.2.10 PCR 产物的纯化……………………………………………32 2.2.11 PCR 产物的酶切……………………………………………32 2.2.12 弓形虫总 RNA 提取……………………………………… 35 2.2.13 RNA 浓度和纯度测定………………………………………36 1 2.2.14 逆转录合成第一链 cDNA …………………………………3