猪瘟伪狂犬病重组病毒SA215A株的构建及生物学特性研讨.pdfVIP

猪传染病 传代中逐渐适应于机体，最后致病力趋于稳定和相同，并完全适应丁．本动物体内。王在等在病毒对细胞的 嗜性的研究中，证实了猪肾细胞(PK．15和SK．6)的细胞膜上存在猪瘟病毒特异受体，用猪瘟兔化弱毒株 的囊膜蛋白制各假病毒同样能感染PK．15细胞，表明猪瘟病毒强弱毒株侵染细胞的机制相似；此外，临床 上由于体内不同抗体水平(即大面积免疫压力)对病毒的特异性影响，年龄、营养状况、不同的饲养条件、 持续感染和免疫耐受等因素对病毒的非特异性干扰，导致发病特点表现出轻重缓急，初次分离的田间株表 传播过程中形成对种群病毒的优势选择，另外，环境因素如温度、阳光以及传播途径也对病毒的优势选择 具有重要的影响【¨J。总之，CSFV致病力差异是一个很复杂的问题，单就临床表现目前还难以给出定论， 还有必要对CSFV从分子水平的致病机理进行深入细致的研究。 参考文献略 1 猪瘟伪狂犬病重组病毒SA2 5(A)株的构建及生物学特性研究 徐志文，郭万柱事，朱玲，王印，王晓玉 (四川农业大学动物生物技术中心，雅安625014) 摘要：采用磷酸钙转染系统，将伪狂犬病三基因缺失疫苗SA215株DNA与PP63LacZE2DNA共转染Veto E2 表明HCV 生物学特性研究，培养特性观察试验表明该毒株可适应Vem、BHK21和鸡胚成纤维细胞等多种细胞，但 测阴性)，接种后28d用106PFU的PRV 肌肉注射攻击，结果表明接种猪能抵御两次病毒攻击，表明SA215(A)株具有良好免疫原性，是一株优 秀的猪瘟、伪狂犬病二价疫苗候选株。 关键词：猪瘟；伪狂犬病：重组疫苗 猪瘟因传染性强、死亡率高，与口蹄疫、伪狂犬病等一道被认为是严重危害和制约养猪业发展的重要 传染病。国际兽疫局将其列为16种A类传染病之一，国家《动物防疫法》将其列为一类传染病。疫苗接 种是目前控制猪瘟最为重要的方法，疫苗的使用，猪瘟在一定程度上得以控制。芬兰、加拿大、英国和日 本等20多个国家相继宣布为无猪瘟国家。国内猪瘟曾基本得到控制，发病率总体小于3％。近年来猪瘟疫 情控制却并未像人们想象的那样顺利，反而呈现逐步上升的趋势，在许多国家和地区大量流行，如英国、 瑞士等国家重新出现了猪瘟流行。包括新型疫苗研究在内的各项针对猪瘟所开展的研究工作又引起重视， 国内在新型猪瘟伪狂犬病重组病毒活载体疫苗的研究工作取得突破性进展，笔者利用包含HCMV和SV40 双重强启动子的PRVSA215株为载体实现了对HCV E2基因表达，试验证明表达确实，重组病毒具有良好 免疫原性，可抵御伪狂犬病和猪瘟的双重攻击。 1材料与方法 1．1质粒与毒株 重组质粒PP63LacZE2、PRV SA215株、猪瘟病毒石门株等均由四川农业大学动物生物技术中心繁殖 330 第六次全国会员代表大会暨第11次学术研讨会 保存。 · 1．2细胞 Vem细胞、BHK21细胞等均购自武汉病毒所细胞保藏中心。 1．3标准血清及抗猪瘟荧光抗体 猪瘟和伪狂犬病标准阳性血清由四川农业大学动物生物技术中心研制保存；抗猪瘟荧光抗体购自中国 兽药监察所。 1．4猪瘟伪狂犬病重组病毒疫苗株SA215(A)的构建 。 1．4．1重组质粒DNA和病毒SA215株DNA同源重组 参照文献ll’2】采用磷酸钙转染法进行。 1．4．2猪瘟伪狂犬病重组病毒SA215(A)株初步鉴定 1．4．2．1 Dot-blots杂交检测 3t 41。 SA215(A)3等12株重组病毒液，同时