植物生物转化技术在药用活性成分生产及新药研究中的应用研究.pdfVIP

植物生物转化技术在药用活性成分生产及新药研究中的应用 于荣敏1．3邱立鹏2赵昱3 药学院，杭州310031) 摘要：本文论述了利用植物生物技术(如植物细胞培养、转基因组织／器官、植物酶 系统等)进行药用活性成分生物转化的发展概况，并对其发展前景进行了评述性展望。 认为植物生物转化技术可能是创制具有自主知识产权新药的新途径。 关键词：生物转化；细胞培养，转基因，活性成分。新药研制 植物的次生代谢产物如生物碱、香豆素、芳香类物质、类固醇以及萜类等是药物、香 料、色素、农药以及食品添加剂等的重要来源。由于高等植物细胞中的次生代谢产物含 量很低且有些产物不能或难于通过化学合成途径得到，因此，人们期望能够充分利用植 物细胞培养以及植物酶对外源底物进行生物转化，从而得到人们想要的目标化合物。许 多利用植物细胞和酶系统进行的生物转化具有部位以及立体特异性，其反应类型包括氧 化反应、还原反应、羟化反应、甲基化反应、乙酰化反应、异构反应、糖基化反应以及 酯化反应等。随着基因操作技术的进步，生物转化具有更大的潜力来克隆和表达目标酶 的外源基因，从而促进其产物的合成。 1概述 1．1定义 指利用植物离体培养细胞或器官、动物、微生物及细胞器等对外源化合物进行结构修饰 而获得有价值产物的生理生化反应，其本质是利用生物体系本身所产生的酶对外源化合 物进行酶催化反应，它具有反应选择性强(立体选择性、位置选择性)、反应条件温和、 副产物少、不造成环境污染和后处理简单等优点，并且可以进行传统有机合成不能或很 不同，在生物降解中，复杂的底物被分解为简单物质。 1．2生物转化的优点 作为生物催化剂，植物细胞培养具有下列优点：(1)可以在实验室中生长，实验重 现性好；(2)细胞可以无限制的生长，培养物可以大量累积，从而源源不断的提供生物 材料；(3)生长循环周期短，利于实验的进行。因此，人们把植物细胞培养当作象微生 物(如酵母、真菌以及细菌等)一样的有用的工具用于生物转化。 利用微生物及其产生的酶进行生物转化能够产生许多有用的化合物。该方法所具有 104 的优点是：(1)生物量倍增时间短，(2)微生物的基因操作方法已广泛建立。而植物生 物转化系统与之相比，生物量倍增时间较长，产生酶的种类较少且酶量低微。虽然具有 这些缺点，植物生物转化还是有它的独特之处：植物中具有许多微生物中不存在的独特 的酶，它们可以催化一定的反应生成许多复杂的化合物，甚至是新化合物；而用化学合 成的方法来合成这些化合物步骤烦琐且费用昂贵。因此利用植物细胞及从植物细胞中分 离出的酶来进行药物生产或新药研制开发具有极大潜力。 1．3可用于生物转化的化合物种类 自然界中存在许多可以进行生物转化的化合物，如芳香族化台物、类固醇、生物碱、 香豆素、萜类、木脂体等。不过，利用植物进行生物转化的化合物并不局限于植物在其 代谢过程中产生的中间体，也可以是人工合成的化合物。 1．4植物生物转化的意义 植物细胞培养具有巨大的产生特定次生代谢产物的潜力。在植物细胞培养中，一些 重要的次生代谢产物并不形成和累积。但是，这样的培养物却保留了将外源底物转化为 有用产物的能力。植物悬浮细胞培养、固定化细胞培养、毛状根培养以及酶都可通过生 物转化产生有用化合物。生物转化既可产生新的化合物、又可改造已有的化合物、增加 目标产物的产量以及克服化学合成的缺点。更重要的是，植物细胞和器官培养由于催化 多步反应常常会产生中间体代谢产物，有助于我们阐明化合物的生物合成途径。而且催 化反应可以在比较温和的环境下进行，副产物较少、耗能少，安全以及减少开支等。此 外，植物生物转化系统还可以与有机合成结合使用而相得益彰。 2植物细胞和器官培养物的生物转化 许多因素都能够影响植物细胞和器官培养物进行生物转化，例如前体物的溶解性、 细胞通透性、有活性的酶量、酶的存在位置、副反应的存在、参加降解目的产物的酶量、 诱导作用、pH值变化以及渗透作用等。 有些物质难溶或者不溶于水，因此其转化速率非常低。通过引入环糊精 complexes)。有机 与各种各样的非极性配基形成极易溶于水的稳定的包合物(inclusion 相的存在会在很大程度上影响植物细胞的生存，因此在这些系统中酶的活性就会降低， 而环