杨梅黄酮对MPP损伤的MES235细胞的保护作用及可能机制研讨.pdfVIP

杨梅黄酮对MPP+损伤的MES23．5细胞的保护作用及可能机制研究 摘 要 帕金森病(Parkinson’sdisease，PD)是老年人常见的一种神经系统退行性疾病， 其最主要的病理学特征为黑质致密带(substantia nigrapar 因和发病机制尚不清楚，可能与遗传因素、环境因素、氧化应激、炎症反应、黑质 (substantia nigra,SN)铁聚积和细胞凋亡等多种因素有关。目前，临床上尚无成熟 有效的药物或方法来阻止或逆转PD的病情发展，因此寻找天然、高效、低毒的抗 PD药物成为了新的研究热点。 杨梅黄酮(myricetin)是一种天然的黄酮类物质。已有实验证明杨梅黄酮具有 抗炎、抗氧化、清除自由基等多种生物活性。为了探讨杨梅黄酮对PD是否具有防 治作用及其可能的作用，本实验应用经典的神经毒性药物1．甲基．4．苯基吡啶阳离子 (1-methyl-4．phenylpyridinium tetrazolium，MTT)法、 胞置备PD细胞模型，采用甲基噻唑基四唑(methylthiazolyl Hochest染色、流式细胞仪分析技术(flow Blots技术， cytometry,FCM)、Western 并探讨了其保护作用的可能机制。实验结果如下： 1．MPP+(200 h后，细胞存活率明显降低，与正常 lunol／L)处理MES23．5细胞24 处理后，可明显减轻MPP+对细胞的损伤(PO．05)。 h后，细胞出现明显的凋亡形态学改 2．MPP+(200“mol／L)处理MES23．5细胞24 变，如细胞核固缩、核碎裂等，与正常对照组相比差别具有高度统计学意义 (PO．001)。10。9mol／L杨梅黄酮共处理可明显减轻上述变化(PO．05)。 3．MPP+(200 h后，细胞线粒体跨膜电位差 pmol／L)处理MES23．5细胞24 (mitochondrialtransmembrane potential，AtPm)明显降低，与正常对照组相比差 别具有统计学意义(P0．05)。加10’9mol／L的杨梅黄酮共处理后，上述变化明 显减轻(PO．05)。 oxide 4．MPP+(200 h后，细胞内活性氧物质(reactive Ilmol／L)处理MES23．5细胞24 species，ROS)生成显著增加，与正常对照组相比差别具有高度统计学意义 {＼叭Y帆2m0叭4m惴2叭8Ⅲ4l＼114嗵 { 5．MPP+(200 l土mol／L)处理MES23．5细胞24h后，凋亡效应酶Caspase-3的活性 o应用10‘9mol／L 明显增加，与正常对照组相比差别具有高度统计学意义(P0．01 的杨梅黄酮共处理可显著抑制Caspase-3活性的增加(PO．05)。 6．MPP+(200 h后，Bcl．2mRNA表达水平明显降 Itmol／L)处理MES23．5细胞24 低，Bax 基因表达的影响(PO．05)。 7．MPP+(200