水溶性紫杉醇衍生物的体外抗肿瘤活性研究.pdfVIP

水溶性紫杉醇衍生物的体外抗肿瘤活性 冯霞李金亮元荚进 (天津大学化工学院，生物化工系，天津，300072) 小细胞肺癌Pc细胞的体外抗肿瘤活·|生．结果袁明，五种衍生物在实验备件下均能水解释被出紫杉醇， 时癌细胞表现出很强的押制作用．因此在行生物中引入的氨基酸“桥”能够调控酯键水解速度． 非小细胞肺_癌PG抗肿瘤活性 关奠词：水溶性紫彤醇新生物^乳腺癌MCF-7 定微管．促进微管聚合与组装，防止其解聚的功能，对许多类型的癌症都有明显的疗效，己由美 国FDA批准，成为卵巢癌、转移性乳腺癌和非小细胞肺癌的一线用药脚，是一种有良好应甩前 EL)与无水乙醇以i：l的混合液来稳 临床制剂中．采用表面活性剂聚氧乙烯蓖麻油(CremphoT 定紫杉醇，给药前用生理盐水或5％葡萄糖液稀释【4】．由于治疗时紫杉醇的用量较大(135mg／m2)， 病人必须忍受高浓度的表面活性剂所带来的超敏性反应．水溶性问题成为制约紫杉醇发展的主要 障碍之一。因此，对紫杉醇进行结构修怖，开发水溶性衍生药物具有深远的意义。 最为适宜。我们借助氨基酸“桥”将紫杉醇连接到水溶性高聚物聚乙二醇(PEG)分子上，合成 了一系列水溶性紫杉醇衍生物【锕．这类衍生物在水中溶解性良好，在体内酶的作用下可以水解 释放出紫杉醇，从而克服了药物转运中的水溶性障碍。本文对所台成的水溶性衍生物的体外抗肿 瘤活性进行了研究。 1材料及仪器 水溶性衍生物：P．T、P．I-T、P．L-T、P-P-T、P-G．T实验室自制 紫杉醇实验室自制 人乳腺癌MCF-7细胞、非小细胞肺癌PG细胞，由医学科学院天津血液学研究所和天津肿 瘤医院提供 RPMI．1640购于Giboo公司 450型 酶标仪：BIO-RAD公司的Model 2实验方法 2．1细胞培养与活细胞计数 还原反应测定肿瘤细胞存活率．活细胞线粒体中存在与NADP有关的脱氢酶．可将黄色的MTT 胞因无上述脱氢酶，MTT不被还原．用DMSO将甲月替溶解后在酶标仪上测出A，，按下式计 算细胞存活率： 细脯活率㈣=黼×10。％ 2,2水溶性紫杉醇衍生物的细胞毒性实验 709 取培养4-5天、处于指数生长期的细胞，加入适量的Trypsin．EDTA液，使贴壁细胞脱落， 用台盼蓝染色后做活细胞计数。加入10ml含5％子牛血清的RPMI．1640培养液配成细胞悬液， 再将悬液用完全培养基稀释到每100ml含l×104个细胞的浓度。 F 取96孔培养板．每孔加100 l细胞悬液．平板置于37℃、5％C02的孵箱中培养24h。待测 成10finol，L的溶液，作l：10的稀释，共6个稀释度．配好的溶液过滤灭菌，加入到平板上的细 胞悬液中，置37℃、5％C02及100％湿度的孵箱中培养96h。 l，37℃温育4h使 取M订用无血清RPMI．1640培养液稀释成lmg／ml的溶液，每孔加50／．t M丌还原，从培养板中吸取上清液．加入150plDMSo使甲月替溶解．振荡摇匀，用酶标仪测 A5”，以不加待测样品的细胞存活率为100％．计算各不同条件下的细胞抑制率。用样品浓度的 对数值与细胞抑制率作线性回归，计算各样品药物对两种细胞的半数抑制浓度Ic。 3结果与讨论 通过上述方法，测定了紫杉醇及其水溶性衍生物对两种癌细胞的抑制率，列于表1。 药物 MCF-7(乳腺癌细胞) PG(qM,细胞肺癌细胞) 浓度 T P．T P．I—TP-L-TP-P-TP．0．T T P_TP-I．TP-L．TP-P-TP—G-1 (mobL) 105 89_383．6 89．7 89．1 90．6 79．7 75．7 79．0 82．0 77．3 l酽 9