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数字化生物显微图象的获取及优化

数字化生物显微图象的获取及优化 黄玖红 同济大学生物技术05级 2007.11 1.CCD知识 CCD:Charged Coupled Device: 电荷耦合器 主要功能:将来自镜头光学图象聚焦,经由CCD转换为随时间变化的视频信号,再经摄象机内部线路处理CCD转换视频信号,然后经由同轴或光缆或其它传输途径将信号传送至电脑经图象卡处理将信号在显示器上显示。 CCD Camera的重要特性: 1、 灵敏度 2、 稳定度 3、 线性 4、 分辨率 5、 暗电流,噪声 6、 量子效率 7、 工作环境 8、 摄象机与镜头的接环(C Mount or F Mount) CCD量子效率 量子效率( Quantum Efficiency )-阴极发射出的光电子数量与入射光光子的数量比,用以表诉CCD在不同波长下的响应值 在同一波长下QE值越高CCD品质越好 CCD对于不同波长的光的响应时间的敏感度不同 背照式CCD比前照式CCD有更好的量子效率 多数衡量QE高低是在425nm波长 CCD系统读出噪音 读出噪音(Readout Noise) 产生噪音的因素 -不能保证在电荷从CCD转移出来并数字话的时候有一个好的重复性,导致相同像素中相同电荷数量进行A/D转换时得不到相同的结果 -传感器及电路产生的随机电荷与像素中有效电荷一起被数字化 -数模转换线圈将会分散一部分有意义的转换值 CCD暗电流 暗电流(Dark Current , Dark Count) -CCD在一定温度下每个像素在一定时间内产生的电荷数 -暗噪音大约为暗电流的平方根 CCD系统信噪比 信噪比( Signal to Noise Ratio ) -衡量信号及噪音的关系 -表征检测的限度(灵敏度) CCD数字化 数字化(Digitization)-模拟信号转换成数字信号 计算机运用2进制运算法则来将CCD采集的电信号转换成数字信号 12bit=4096;14bit=16384;16bit=65536 应用软件将运用一定的运算法则来决定最适合显示器灰度级别的数据 CCD接口 普通CCD曝光超过10秒--发热; -20度摄像头可拍摄5分钟图像; -40度摄像头拍摄时间可超过1小时 Cool CCD 消除热或暗电流产生的噪音 Cool CCD特点 -噪音底,图像质量高 -灵敏度高,感光效果佳 -几何失真度小 -解析度稳定,补偿效果佳 -耐震动,不易受点磁场干扰 -体积小,消耗功能小 -寿命长,故障率低 2如何组建自己的显微图像分析系统 显微图像分析系统的组成 硬件选购 (1) 显微镜 显微镜的选购应该根据分析工作性质来定,如分析细胞组织可选用生物显微镜,分析金属材料可选用金相显微镜,分析纳米级的显微组织可选用电子显微镜等。 (2)图像数字化设备 显微镜中观察到的图像都是连续的模拟图像。利用计算机处理图像之前,必须将图像数字化。 图像的数字化由两步组成: a.图像的空间量化:将图像在空间域中离散化。 b.图像值域量化:将图像的色度值量化。上述工作可以用图像数字化设备来完成。对于显微图像分析系统,图像数字化设备主要为数码相机和CCD摄像机+图像采集卡 (3)计算机选购 计算机是软件的载体,目前市场上的选择余地很大。 (4) 图像输出设备 彩色喷墨打印机,激光打印机,视频拷贝机等都可完成图像输出工作。 1).最简单的数字化显微图象 ——数字化目镜 数码相机成像系统简介 一般使用数码相机通过各种接口和显微镜的组合,然后数码相 机和计算机相连,即时拍摄图像,并传输到计算机 数码显微摄影的优点 可即时浏览拍摄,拍摄后的照片即时观看,减少废片率 拍摄后的照片即时传入到计算机的分析软件,即刻得出分析接结果,大大缩减了因冲洗照片而耽误 大量时间,从而解决了实验的连续性的问题 数码显微摄影拍摄的图片为数字化的文档,可即刻用于power point教学或日后的编辑出版工作。 应用实例 CCD摄像机+图像采集卡 系统组成 实例图 * * * 噪音常常表现在电子元件传输或接收信号的时候 C-Mount F-Mount Advantages Disadvantages Advantages Disadvantages Lower f/stop available Faster imaging Less expensive Increase perceived sensitivity As f/stop decreases, spherical aberrations increase Few spherical aberrations Optically superior More e

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