Leptin对POMC及下丘脑垂体轴的调节.pdf

中文摘要 Leptin对POMC及下丘脑一垂体轴的调节 摘 要 1994年，Zhang等学者利用定位克隆技术成功克隆了小鼠的肥胖基因 (obese gene，ob)及人类的同源序列，ob基因编码的蛋白质产物被称为 信号联系参与调节能量平衡和生殖这一存在了40多年的假说得以证实。 ob／ob鼠和db／db(diabete 的基因突变而具有相似的表现：严重的早发肥胖，严重的胰岛素抵抗，饮 食过多，能耗降低，不孕不育。但是，给予ob／ob鼠腹腔注射leptin后， 不仅体重和摄食恢复至正常水平，生育能力也得以纠正；在雌性ob／ob鼠 卵巢和子宫的重量增加，血清黄体生成素(1uteinizing 度增加，原始卵泡和囊状卵泡数量增多；在雄性ob／ob鼠睾丸和精囊腺重 量增加，生成精子数量增多。这些实验结果说明leptin在调节摄食与能量 消耗的同时也参与了对生殖功能的调控。 是直接还是间接调节下丘脑一垂体一性腺轴，仍旧需要更多的工作去阐 神经元表达的影响以及对下丘脑．垂体轴激素分泌的调节作用，研究leptin 对下丘脑．垂体轴的可能影响，初步探讨leptin调控生殖的可能作用机理， 为leptin的临床应用提供实验依据。 研究内容与结果如下： 一、Leptin对POMC基因及蛋白水平的调节 目的：观察侧脑室微量注射leptin对去卵巢给予一定量雌激素补充的 雌性大鼠下丘脑POMC基因及转录后水平的影响。 estrogen primed)。在无菌条件下行双侧卵巢切除术，术后从第8天开始每 天皮下注射苯甲雌二醇25“g／只，注射5天后根据George RatBraininstereotaxic Watson编著的((The mm，旁开1．5 Bregma点后1．0 mm，进针深4．0mm，行侧脑室微量注射。 中文摘要 5儿l，对照组注射生理盐水59l；分别于微量注射后1h、 实验组注射leptin 2h、4h、6h以视交叉、乳头体为前后界，下丘脑沟为侧界，深约3mm左 右为标准取下丘脑。迅速取出大鼠的下丘脑组织，称重，在低温下研磨制 的要求严格取下丘脑，置冻存管中保存于液氮中，依照Trizol的说明提取 量注射后大鼠下丘脑组织POMC blot mRNA表达的变化。根据Western 的实验步骤，检测大鼠下丘脑组织POMC蛋白表达的变化，并且对实验 结果进行统计分析。 结果：1)大鼠下丘脑组织POMC mRNA的表达在侧脑室微量注射 leptinlh后有所增高，但与对照组相比没有显著性差异(P0．05)；在注射 2h后POMCmRNA表达增高明显，4h后POMCmRNA表达量达到高峰， mRNA表达显著降低， 与对照组相比有统计学差异(PO．05)；6h后POMC lh后， 与对照组比较没有统计学差异(PO．05)。2)侧脑室微量注射leptin 大鼠下丘脑组织POMC蛋白含量没有变化，与对照组相比在统计学上没 照组比较均具有明显的统计学差异(PO．05)。 mRNA 结论：1)侧脑室微量注射leptin后，对下丘脑组织中的POMC 表达的调节具有正向调节作用。2)侧脑室微量注射leptin后，对下丘脑 神经元对机体能量平衡与营养状态起着调节作用。 二、侧脑室注射Leptin、cL。MSH对下丘脑一垂体轴激素分泌的影响 目的：采用侧脑室微量注射leptin、0【．MSH，观察在注射后不同时间 脑一垂体一生殖轴的调节作用。