PDTC对暴发性肝衰竭大鼠肝组织NFκB及其调控炎症细胞因子的影响.pdf

中文摘要 PDTC对暴发性肝衰竭大鼠肝组织 NF．KB及其调控炎症细胞因子的影响 摘 要 failure，FHF) 目的：暴发性肝衰竭(fulminant hepatic 是一种由多种原因引起的肝细胞急性大量坏死和严重肝功 能损伤所致的临床综合征。暴发性肝衰竭具有起病急，病情 进展快，并发症多，治疗难度大，死亡率高，预后极差的特 点，是当前肝病研究的热点和难点。其发病机制非常复杂， 迄今未能完全阐明。 在我国，引起FHF的病因主要是病毒性肝炎，其次是 药物和中毒等因素。目前的研究认为，细胞因子网络的激活 在暴发性肝衰竭的发病机制中起着重要作用。其中核因子． K factor-K B(nuclearB，NF．KB)在暴发性肝衰竭炎症反应 中的重要调控作用已被证实，NF．KB是一类重要的转录调 控因子，被认为是调节前炎症因子基因表达的关键成分之 一，诱导炎症细胞因子、趋化因子、黏附分子、炎性酶等的 表达，在多种炎症性疾病的炎症部位高度活化。已有研究证 实，在肝脏炎症、纤维化、肝细胞凋亡与再生、肝脏缺血再 灌注损伤等病理生理过程中均伴有NF．KB的活化，是调控 肝脏病理损害重要的转录因子。 necrosis 肿瘤坏死因子．Q(面南or factor-Q，TNF．Q)、 nitricoxide 诱导型一氧化氮合酶(inducible 是炎症反应的重要介质，在很多炎症反应中均有它们的活化 中文摘要 和表达。TNF．Q本身是NF．KB的激活剂，而NF．KB的活 化又能促进TNF．a的活化和释放，形成一个恶性循环。 TNF．Q和NF．KB的活化皆能诱导iNOS，从而引起一氧化 氮(nitricoxide，NO)释放，形成级联瀑布效应，促进肝损 伤和发展，从而引起肝细胞大量坏死。 dithiocarbamate， 吡咯烷二硫代氨基甲酸(pyrrolidine PDTC)是一种抗氧化剂，能特异性抑制NF．KB活化。但 抑制NF．KB的活化对暴发性肝衰竭病情进展的影响如 何?研究甚少。本研究基于上述理论，检测D．氨基半乳糖 LPS)导致的大鼠暴发性肝衰竭及应用PDTC后肝组织NF． K B与肝细胞 B、TNF．Q和iNOS的表达情况，分析NF．K B表达对大鼠暴发性肝衰竭炎症损伤的影响及其分子机制， B在暴发性肝衰竭炎 从分子生物学角度进一步证实NF．K 症损伤中的作用，为临床如何调节NF．KB活性治疗暴发性 肝衰竭提供理论依据。 方法：l研究对象：雄性清洁级Wistar大鼠60只，体 LPSl0pg／kg，制造暴发性肝衰竭模型。PDTC组制作FHF 12，24小时行股静脉放血处死，各时间点取模型组6只， PDTC组6只大鼠。留取血清，放血处死后立即剖腹取肝脏， 取适量肝组织经10％中性甲醛溶液固定，余经液氮速冻后 中文摘要 置．80℃冰箱保存备用。3肝组织标本采用常规HE染色： 光镜下观察肝脏病理学改变。4采用免疫组化S．P法，对肝 组织标本进行NF．KB、TNF．Q和iNOS的免疫组化染色。 5应用全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶 (alanine transaminase，ALT)和总胆红素(totalbilirubin，TB) linked 水平。6采用酶联免疫吸附试验(enzyme im