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浙江大学学报(农业与生命科学版) 38(2)：153～158，2012
JournalofZhejiangUniversity(Agric．＆ LifeSci．、
文章编号：1008—9209(2012)02—0153—06 DOI：10．3785／j．issn．1008—9209．2012．02．006
抗麦草畏多克隆抗体的制备及其间接竞争ELISA检测方法的建立
张花美，李因来，潘熙萍，蒋爱兰，余榛榛 ，施曼玲
(杭州师范大学 生命与环境科学学院，浙江 杭州 310036)
摘要 为建立麦草畏的免疫分析方法，采用碳化二亚胺法将麦草畏 (DIC)与卵清蛋 白(OVA)和牛血清
蛋 白(BSA)偶联 ，分剐合成免疫原与包被原；用合成的免疫原免疫新西兰大白兔获得抗麦草畏 多克隆抗
体 ，该抗体效价为 1；1．28×1O，且该抗体与麦草畏 的结构类似物 2，3，5一三氯苯 甲酸、2，3，6一三氯苯 甲
酸、2一氨基一3，5一二氯苯 甲酸 的交叉反应率均小于0．1 ．以包被原 1：8000和多抗溶液 1：80000的稀释
倍数为工作浓度，建立麦草畏 间接竞争 ELISA(ciELISA)检测方法 ，此方法检测麦草畏 的线性范围为
1～100ng．mL一，线性 回归方程为 一8．6844In-z+15．0。1，R 一0．9944，最低检测限为 IC2。-=1．779
ng．mL ；玉米粉和面粉空 白样品的麦草畏添加回收实验表明，麦草畏添加值为 5～30 g-kgI1时，玉米
粉 中的麦草畏回收率为 53．O8 ～92．37 ，面粉 的回收率则分别为 66．5 ～94．63 ．
关键词 麦草畏 ；多克 隆抗体 ；间接竞争酶联免疫吸 附试验
中图分类号 Q503；S482．4 文献标 志码 A
ZHANG Hua—mei，LIYin-lai，PAN Xi—ping，JIANGAi—lan，YUZhen-zhen，SHIMan-ling(Collegeof
LfeandEnvironmentalSciences。HangzhouNormalUniversity，Hangzhou310036，China)
Preparation ofpolyclonalantibodyagainstdicambaand establishmentofindirectcompetitiveELISA for
dicambadetection．JournalofZhejiangUniversity(Agrie． LifeSci．)，2012，38(2)：153—158
Abstract Inorderto establish theimmunoassaymethodofdicamba(DIC)，thediiminecarbonization
methodswereused to synthesizeimmunogen and coatingantigen by dicambabeing conjugated to
ovalbumin (OVA)and bovineserum albumin (BSA)，respectively．Thepolyelonalantibodiesagainst
dicambawere prepared through immunizing New Zealand white rabbitswith the immunogen．The
enzyme-linkedimmunosorbentassayfELISA)titeroftheantibodywas1：1．28×10 ．Thepercentages
oftheantibodycrossreactivitywithotheranaloguesofdicamba (2，3，5-trichlorobenzoicacid，2，3，6一
trichlorobenzoicacid and 2-amino一3，5-dichlor0benzoic acid) were all1ess than 0．1 ．An indirect
competitiveELISA (ciELISA)wasdevelopedfordicambadetection，withc
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