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现代检测技术 ——环境分析化学的发展与应用 第2 章 色谱分析的理论与应用 色谱分析：利用混合物中不同组分在两相间的分配系数的差别，在两相做相对运动时，各物质在两相间进行多次分配，从而使各组分得到分离。 Martin 用热力学的观点描述了组分在色谱柱内的分配平衡和分离过程。 保留值：试样中各组分在色谱柱内保留特性的数值。 保留时间tr、死时间t0、调整保留时间tr?； 保留体积Vr、死体积V0 、调整保留体积Vr? ； 相对保留值r2,1： 相对保留值只与柱温及固定相性质有关，与柱长度、柱径、流动相流速等无关。 流出曲线的信息 组分最小个数、、定性分析、定量分析； 分离效能、选择性。 两峰之间的距离：由组分在两相间的分配系数决定，与色谱过程的热力学有关。 分配系数：在一定温度和压力下，组分在固定相和流动相之间分配达平衡时的浓度之比值。 分配比：在一定温度和压力下，组分在两相间分配达平衡时，分配在固定相和流动相中的质量比。 由Martin引入的塔板理论，用热力学的观点描述了组分在色谱柱内的分配平衡和分离过程。 显然，对于长度为 L 的色谱柱，塔板数 n 越多，理论塔板高度 H 越小，柱效能就越高。 在保留时间 tr 中扣除死时间 t0，可以得出计算有效理论塔板数 neff 的关系式： 另外，流出曲线在 n50 以后，趋于正态分布。其表达式： 色谱峰的宽度：由组分在色谱柱中传质和扩散行为决定的，与色谱过程的动力学性质有关。 速率理论吸收了塔板高度的概念，用动力学的观点描述了组分两相之间的扩散和传质过程。 u —— 流动相在柱内的线速度； A —— 涡流扩散项系数； B —— 分子扩散项系数； C —— 传质阻力系数。 (1) 涡流扩散项 A：流动相受固定相颗粒的障碍，不断改变方向，使组分分子形成类似“涡流”的流动。 A 与填充物的平均粒径 dp 和填充不规则因子 ? 有关： (2) 分子扩散项 B/u：浓度梯度造成组分分子的纵向扩散，使谱带展宽。 B 与弯曲因子 ? 和组分在流动相的扩散系数 Dg 有关： (3) 传质阻力项 Cu：气相色谱与液相色谱的传质过程不同，传质阻力系数的计算也不同。对于气相色谱，传质阻力系数包括气相传质阻力系数 Cg 和液相传质阻力系数 Cl。 填充柱的气相传质阻力系数为： 液相传质阻力系数为： (4) van Deemter方程：气相色谱的板高方程为： 方程指出了色谱柱填充的均匀程度、填料的粒度、流动相的种类以及流速、固定相的液膜厚度等对柱效的影响。 对于液相色谱，van Deemter方程可表示为： 定义分离度： R 越大，表明相邻两组分分离得越好，R = 1.5 时认为两峰已完全分离； 则色谱的分离方程可表示为： 或者 对确定的固定相，分离度将取决于理论塔板数n；而选择合适的固定相和流动相，使 ? 尽可能的大，是提高分离度的根本方法。 第2 章 色谱分析的理论与应用 填充柱在运行中存在严重的涡流扩散，影响柱效的提高。Golay 发明的空心毛细管色谱柱解决了这一问题。 毛细管柱的理论塔板数每米约 2000 ~ 5000，总柱效最高可达106。还具有柱容量小、出峰快等特点。 毛细管气相色谱仪在柱前有一个分流/不分流进样器，柱后加一个尾吹气路。 大口径毛细管（0.53 mm）柱的使用，使得毛细管柱的直接进样系统得到发展。 毛细管色谱柱分填充型和开管型两种。 填充型：填充毛细管柱、微型填充柱。现已很少使用。 开管型：主流毛细管柱，有多种形式。 涂壁开管柱：经典毛细管柱，最常用的一种。 多孔层开管柱：涂层为固体吸附剂，气固色谱柱。 载体涂渍开管柱：内必有载体涂层，柱容量大。 交联型开管柱：固定液在毛细管壁上交联，发展迅速。 键合型开管柱：固定液与毛细管壁通过化学键连接。 毛细管柱长度可达 10 ~ 100 m，内径在 0.1 ~ 0.8 mm。 与填充柱相比，毛细管柱有如下特点： 渗透性好，比渗透率是填充柱的 100 倍，因而毛细管柱可以长达几百米； 相比率大，有利于提高柱效并实现快速分析； 与填充柱相比，毛细管柱有如下特点： 柱容量小，允许进样量少，一般 10-3 ~ 10-2 ?l； 总柱效高，可达 106 左右； 涡流扩散项 A = 0； 色谱柱固定液的极性对其性能影响较大，与毛细管柱的对应关系如下： 色谱柱固定液的选择一般以 “相似相溶” 为原则； 分离非极性物质：选用非极性固定液，按组分的沸点由低到高流出； 分离极性物质：选用极性固定液，按组分的极性由小到