大花三色堇热激蛋白70（HSP70）基因片段的分离.pdfVIP

第42卷 第7期 东 北 林 业 大 学 学 报 Vo1．42No．7 2014年 7月 JOURNALOFNORTHEASTFORESTRYUNIVERSITY Ju1．2014 大花三色堇热激蛋 白70(HSP70)基 因片段的分离 ’ 黄伶俐 杜晓华 穆金艳 陈宏志 刘会超 (河南科技学院，新乡，453003) 摘 要 为了获得三色堇耐热性相关的基因HSP70基因，根据GenBank上登录的拟南芥、陆地棉等HSP70基 因序列设计引物．用同源克隆法分离出大花三色堇HAR的HSP70基因片段 ，并进行测序与比对。结果表明：克隆 得到基因片段，长度为 882bp，其序列与已公布的几种植物HSP70的编码区相似率平均为 85．1％，上游引物含于基 因片段中。初步证明此基因片段为三色堇HSP70基 因片段。 关键词 大花三色堇：HSP70基因；基因克隆；序列分析 分类号 Q343．1+1 CloningofGeneFragmentofHSP-／0inV／o／axwittrockiana／HuangLingli，DuXiaohua，MuJinyan，ChenHongzhi， LiuHuichao(HenanInstituteofScienceandTechnology，Xinxiang453003，P．R．China)／／JournalofNortheastForestry University．-2014．42(7)．一105～107 InordertoobtaintheheatresistancegeneHSP70ofViola~wittrockiana。theprimersweredesignedbasedonthese． quenceoftheHSP70genesequencesofArabidopsisthaliana，Gossypium hirsutum andotherplantsinGenBank．TheHSP70 genefragmentofpansyHAR wereclonedbyhomologycloningandtheframg entwassequenced．Thelengthofgeneframg ent 0fHAR were882bp．thegenesequenceshared85．1％ similarratewiththeCDSofHSP70．andtheforwradprimerwasin． cludedinthefragment．Th eresultsprovidedevidencethatthegeneframg entweretheHSP70ofpnasyHAR． Keywords V／olaxwittrockiana：HSP70gene：Genecloning：Sequencesimilarity 大花三色堇(Violaxwittrockiana)．又名蝴蝶花、 该蛋 白的基因。三色堇耐热种质 HAR是否含有 猫脸花和鬼脸花等．其品种繁多且色彩鲜艳，花期长 HSP70基因，其HSP70基因有什么特点，是值得探 且耐寒，有 “花坛皇后”的美誉．是我国重要的花坛 索的问题。为此，本研究试 图从耐热三色堇种质 和盆栽花卉，在我国广泛栽培 【11。一般大花三色堇 HAR中分离出HSP70基因，并进行序列分析，为揭 品种不耐高温，在华北地区超过 35℃．植株生长不 示三色堇耐热分子机理积累资料。 良并逐渐死亡。HAR为近年本课题组发现的特有 1 材料与方法 耐热三色堇种质。 虽然植物的抗热性是受多基因控制的复杂性 大花三色堇品种HAR，由河南科技学院三色堇 状，但近年在植物体中发现的热激蛋 白(HeatShock 育种实验室提供，该材料从荷兰Buzzy种选育所得， Proteins，HSPs)被证明与植物的抗热性成正相关，在 耐热性好能越夏