高效液相色谱法测定止痛化癥胶囊中丹参素的含量+研究.pdfVIP

高效液相色谱法测定止痛化癥胶囊中丹参素的含量 门英 杨晓腾 薛亚光 任乔森 吉林省药品检验所 长春 130062 摘要 目的 建立高效液相色谱法测定止痛化癥胶囊中丹参素含量的方法 方法 采用色谱柱 Diamonsil C18 4.6×250nm 5 m 流动相为甲醇 水 二甲基甲酰胺 冰醋酸 2 95 2 1 流速 1.0ml/min 柱温 30 检测波长 283nm 进样量 10µl 外标法定量 结果 丹参素的 进样量在 0.24µg 0.86µg 范围内与峰面积有良好的线性关系 r=0.9999 精密度 RSD 为 2.11% 平均加样回收率为 98.8% RSD 为 1.1% 结论 所建立的方法简单 准确 可靠 可有效地控 制该制剂的质量 关键词 止痛化癥胶囊 丹参素 高效液相色谱法 止痛化癥胶囊系由党参 黄芪 白芷 丹参 延胡索等十九味组成的复方中药制剂 具有 活血调经 化症止痛 软坚散结的功效 原标准收载于中华人民共和国卫生部药品标准中药成 方制剂第十三册 原标准只有性状和检查项 无含量测定项 为控制该制剂质量 进一步提高标准,本实验采 用高效液相色谱法测定该制剂中的丹参素含量 结果准确 重现性好 1 实验方法 1.1 仪器 试药与样品 岛津 10AT - vp 高效液相色谱仪 N-2000 浙江大学色谱工作站 丹参素钠对照品由中国药 品生物制品检定所提供 批号 0855 200102 含量测定用 甲醇为色谱纯 其它试剂均为分析 纯 样品由通化茂祥药业有限公司 吉林金宝药业有限公司和吉林省辉南天泰药业有限公司提 供 1.2 对照品溶液的制备 取丹参素钠对照品适量 精密称定 加 50 甲醇制成每 1ml 含 50 g 的溶液 即得 1.3 供试品溶液的制备 取装量差异项下的供试品 研细 取约 1g 精密称定 精密加入盐酸溶液 1 50 50ml 称定重量 超声处理 功率 250W 频率 50KHz 30 分钟 放冷 称定重量 用盐酸溶液补足 减失的重量 再加入 5g 氯化钠溶解 摇匀 离心 精密吸取上清液 25ml 置分液漏斗中 用醋 酸乙酯振摇提取 4 次 50 30 20 20ml 合并醋酸乙酯液 置水浴上低温蒸干 残渣用 50 甲醇溶解并转移至 10ml 量瓶中 加 50 甲醇至刻度 摇匀 即得 1.4 测定法 分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液各 10µl 注入液相色谱仪 测定 即得 计算值乘 以丹参素钠与丹参素的系数0.9 即得丹参素含量 2 方法学考察 2.1 测定波长的选择 取丹参素钠对照品的 50 甲醇溶液 经 UV 2201 紫外分光光度计 在 190 350nm 范围 内扫描 丹参素在 283nm 波长处有最大吸收 图 1 故选择测定波长为 283nm 2.2 流动相及色谱柱的选择 在实验过程中 还对丹参中的另一成分原儿茶醛进行了测定 采用了甲醇 1 冰醋酸 6 94 甲醇 1 冰醋酸 8 92 等流动相进行分离 但丹参素的分离效果都不佳 在正文的提 取方法和色谱条件下 原儿茶醛出峰的时间较长 峰形不好 且峰面积很小 原儿茶醛的含量 1 远低于丹参素的含量