高效液相色谱法测定注射用阿莫西林钠克拉维酸钾的有关物质研究.pdfVIP

高效液相色谱法测定注射用阿莫西林钠克拉维酸钾的有关物质 范柏 鲁瑞娟 沙立斌 天津市药品检验所 天津 300070 摘要 目的 采用高效液相色谱法测定注射用阿莫西林钠克拉维酸钾的有关物 质 方法 Dikma ODSC18色谱柱 250mm×4.6mm,5µm ,磷酸盐缓冲液 磷酸二 氢钠7.8g加水900ml溶解 用磷酸调节PH值至4.40.1,加水至1000ml- -1 甲醇 955 为流动相 室温,流速0.8mlmin,检测波长220nm,自身对照外 标法 结果 阿莫西林在0.183µg 克拉维酸在0.0360.6µg范围内呈良好 的线性关系 r分别为0.9999和0.9999精密度试验RSD分别为0.12%和0.16%, 最低检出量分别为0.06µg和0.012µg 结论 本方法简便 快速 准确 可有 效控制质量 关键词 阿莫西林钠克拉维酸钾 有关物质 高效液相色谱 阿莫西林钠克拉维酸钾是一种由ß- 内酰胺类抗生素与ß-内酰胺酶抑制剂组 成的复方制剂 最初由葛兰素.史克制药公司研究开发 早在1997年即有Reading 等报道 克拉维酸可对ß-内酰胺酶产生一种不可逆的抑制作用 其特性增强了 [1] 阿莫西林的效果 由于克拉维酸盐对多种ß-内酰胺酶都是一种强有力的抑制 剂 其与阿莫西林的复合剂型因此而成为抗菌活性更强 抗菌谱更广的抗生素 近年来在临床应用方面广受欢迎 注射用阿莫西林钠克拉维酸钾目前美国药典26版与欧洲药典2002版均未 收载 中国药典2000年版虽已收载 但未制定有关物质检查项 关于阿莫西林 本身在一定浓度的水溶液中会发生降解 且会随时间延长和温度升高而加快的情 [2] 况早有报道 因此 在该药品广泛应用于临床的今天 建立其有关物质的检验 方法 对于更好地控制其内在质量是很有必要的 本文参考中国药典及有关资料 采用反相高效液相色谱法 建立了注射用 阿莫西林钠克拉维酸钾有关物质的检查方法 获得了良好的分离效果 可达到有 效控制质量的目的 1 仪器与试药 岛津LC-10A高效液相色谱仪 SPD-6A紫外检测器 C-R6A数据处理机 注射 用阿莫西林钠克拉维酸钾为市售品 规格1.2g,阿莫西林1.0g,克拉维酸0.2g, 阿莫西林与克拉维酸对照品均来自中国药品生物制品检定所 乙腈为色谱纯 磷酸氢二钠为分析纯 2 色谱条件 色谱柱 Dikma ODS250mm4.6mm,5µm 流动相 磷酸盐缓冲液 磷酸二氢 钠7.8g加水900ml溶解 用磷酸调节PH值至4.40.1,加水稀释至1000ml -1 -甲醇 955 流速 0.8mlmin柱温 室温 检测波长220nm进样量10µl 在此条件下 组分流出顺序为 克拉维酸 阿莫西林 理论板数按阿莫西林峰计 为6000克拉维酸峰与阿莫西林峰的分离度为11 3 溶液配制与实验方法 取注射用阿莫西林钠克拉维酸钾混合样品约360mg(相当于阿莫西林300mg, 克拉维酸60mg),精密称定 置100ml量瓶中 加水溶解并稀释至刻度 摇匀 作为供试品溶液 精密量取2ml置100ml量瓶中 加水稀释至刻度作为对照溶液 量取对照溶液10µl注入液相色谱仪 调解仪器灵敏度使阿莫西林峰约为满量程 的10%15%再准确量取对照溶液与供试品溶液各10µl分别注入液相色谱仪 记录色谱图至阿莫西林峰保留时间的二倍 供试品溶液的色谱图中如出现杂质 峰 量取单一杂质和杂质总和的峰面积 分别与对照溶液中两主成分峰面积之和 2.0%相比较 计算单一杂质量与杂质总量 4 线性范围 精密量取供试品溶液20ml置100ml量瓶中 加水稀释至刻度 摇匀 分别精 密量取0.30.51 2 3和5ml置10ml量瓶中 加水稀释至刻度 摇匀 在 上述色谱条件下分别进样 分析 以进样量为横坐标 以相应的峰面积为纵坐标 进行线性回归 结果表明 阿莫西林在进样量0.18µg 3µg范围内与其峰面积 2 呈良好线性关系 线性方程为Y=12.65210X-14.304,r=0.9999克拉维酸在进 样量0.036µg 0.6µg范围内与其峰面积呈良好线性关系 线性方程为Y=18.9