产纤维素酶增效蛋白菌株的筛选及培养条件优化研究.pdfVIP

第27卷第 1期 高 校 化 学 工 程 学 报 No．1 、，01．27 2013 年 2月 JournalofChemicalEngineeringofChineseUniversities Feb． 2Ol3 文章编号：1003-9015(2013)01-0113．06 产纤维素酶增效蛋白菌株的筛选及培养条件优化 覃益民 ，一， 陶 恒 ，刘幽燕 -一，李青云 ， (1．广西大学 化学化工学院，广西 南宁 530004；2．广西生物炼制重点实验室，广西 南宁 530003) 摘 要：为了寻找高效的产纤维素酶增效蛋白菌株，建立一种筛选方法从土壤中筛选得到一株产纤维素酶增效蛋白的 细菌POEP1，其所产增效蛋白对纤维素酶(来源于黑曲霉Aspergillusniger)的滤纸酶活有明显的增效作用，通过对其进 行 16SrDNA分类鉴定，确定该菌株为栖稻假单胞菌(Pseudomonasoryzihabitans)。为进一步提高POEP1产纤维素酶增 效蛋白的水平，对其培养条件进行优化。采用单因子试验筛选出最佳碳源为麦麸，最佳氮源为黄豆粉。再通过 Plackett-Burman设计对与发酵相关的 l1个因子进行试验，筛选出麦麸、黄豆粉和 KH2PO4为 3个主要显著因子；由 Box．Behnken实验结合响应面分析确定主要因子的最优水平为：麦麸质量浓度 32-3g．L-，黄豆粉质量浓度 24．7g．L～， KH2PO质量浓度 4_36g．L『。优化后纤维素酶增效蛋白的产量提高 1．7倍，增效活力由l5．79U．mL 增至43-3lU．mL-。 关键词：纤维素酶增效蛋白；PlackeR．Burman设计；响应曲面：发酵优化 中图分类号：TQ925．9；Q556．9 文献标识码：A DOI：10．3969~．issn．1003．9015．2013．01．019 ScreeningoftheCellulase-·Enhancing--ProteinProducingStrainand OptimizationofitsCultureConditions QINYi．min，一，TAOHeng，‘LIUYou-yan ，LIQing-yun， (1．SchoolofChemistryandChemicalEngineering，GunagxiUniversity,Nanning530004，China； 2．Gunagxikeylaboratoryofbiorefmery,Nanning530003，China) Abstract： A self-designed screening modelwasbuiltforthe screenni。g ofhtehigh-efficientcellulase- enhnacing-protein producing strains．A strain (named POEP1)，having hte ability ofproducing cellulase-activiyt-ehnancing-protein，Was isolatedfrom htesoil，nadhtenaccordingtohte16SrDNA gene sequencingna alysis，thesrtainWas identifiedtobePseudomonasoryzihabitans．Somefermentationconditions wereoptimized to increasetheprotein productivity．Themostsuitablecarbon andnitrogen sourceswere determinedtobewheatbrna nadsoybeansmealinhtesingle-factorexperiments，respectively．Threekeyfactors such as massconcentrationsof