高效阴离子交换色谱脉冲安培检测法分析蜜枣中的糖类化合物研究.pdfVIP

囝 ＼：“l少 440 第十二届全国离子色谱学术报告会论文集福建厦门2008．11．5-8 高效阴离子交换色谱一脉冲安培检测法分析蜜枣中的糖类化合物 黄晓书1，徐鹏1，李卫华2刘娜1，李鹏坤1，孙雨安3 1 l河南农业大学生物技术重点实验室，郑州45000 2戴安中国有限公司，北京100029 3郑州轻工业学院应用化学系，郑州450001 x 摘要：采用CarboPacPAl0(4 为工作电极，Ag／AgCI为参比电极的积分脉冲安培离子色谱法，分析了市售蜜枣中的糖类化合物成分及含量。 实验结果表明，蜜枣中主要含葡萄糖，果糖和蔗糖。各组分线性关系良好，相关系数R为0．9997～0．9999，加 标回收率在86．5％～119．8％，检出限0．2～0．5pg，L(进样体积25¨L’峰面积定量)。该法具有灵敏度高、精密 度好、分离效果好和样品不需要衍生处理的优点。 关键词：离子色谱法；安培检测；蜜枣；糖类化合物 蜜枣是常用食品，具有补益脾胃，滋阴养血，养心安神，缓和药性的功效。药理研究发 现，作为蜜枣活性成分的糖类化合物能够促进白细胞生成，降低血清胆固醇，提高血清蛋白， 保护肝脏。由于糖类化合物不具有发色基团，所以不能用吸收法检测。传统的糖含量的测定 多采用苯酚一硫酸比色法测定总糖，而后水解多糖为单糖，用纸色谱法、硅胶G薄层色谱法、 衍生化气相色谱法、气相色谱．质谱法、直接示差折光检测或衍生光度检测的高效液相色谱法、 毛细管电泳法进行每种多糖中的单糖组成分析【l刁】。然而这些方法都存在操作复杂、需要衍生 化处理、灵敏度较低和选择性差等缺点。高效阴离子交换色谱．脉冲安培检测(HPAEC．PAD) 是近年来发展起来的仪器分析方法降61，无需衍生，可以直接分离分析测定氨基酸和糖类化合 物，适用于单糖、二糖、小分子寡糖的测定。 本研究主要目的是分析国内蜜枣中糖类化合物的成分，并与伊拉克蜜枣进行对比。建立 了CarboPacPAl0阴离子交换柱分离，以NaOH溶液、水为淋洗液，以四电位波形检测糖类，在 15 min内分离并测定蜜枣中的单糖与低聚糖的方法。该方法前处理简单，选择性好，准确度高， 适用于各种蜜枣中葡萄糖、果糖、蔗糖的测定。 1实验部分 1．1仪器和材料 Dionex ICS．3000离子色谱仪(美国Dionex公司)，包括带有在线脱气装置的四元梯度 泵，自动进样器(配有25 6．80色谱工作 pL定量环)，柱温箱，电化学检测器，Chromeleon PAl0(4×250lnm)糖分析柱； 站；Milli．Q超纯水设备(美国MiUipore公司)；CarboPacTM CarboPacTM CarboPacTM PAl0(2×50mm)氨基酸捕集柱； PAl0(4×50mm)糖保护柱： 0．22 pm一次性滤头；超声波清洗仪(常州国华)；Universal320R高速冷冻离心机(德国Hettich 公司)。 D．葡萄糖，D．果糖，蔗糖标准样品(美国Sigma公司)。实验用水均为电阻率不低于18．3 Mrl·cm的超纯水。250mmol／LNaOH淋洗液：在1L塑料淋洗液瓶中加入经O．22“m尼龙滤膜过 滤的超纯水987mL，然后用移液管取50％w／wNaOH，约19．1 mol／L(AlfaAesar公司)浓溶液 的上清液13．1 mL于该淋洗液瓶中。为防止淋洗液吸收空气中的C02，淋洗液配制完毕后和实 验过程中在淋洗液瓶上施加氮气保护。 ◎ 第十二届全国离子色谱学术报告会论文集福建厦门2008．11．5-8441 实验用蜜枣样品为市售不同产地蜜枣：伊拉克蜜枣(郑州轻工业学院孙雨安教授