甲苯二异氰酸酯在小鼠胃中体外代谢的研讨.pdf

中国环境科学学会学术年会优秀论文集(2006) 甲苯二异氰酸酯在小鼠胃中体外代谢的研究 郎 朗1’2 季宇彬1’2 (1．哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心黑龙江哈尔滨150076； 2．哈尔滨商业大学药物研究所博士后科研工作站 黑龙江哈尔滨 150076) 摘要 目的：研究甲苯二异氰酸酯在小鼠胃中的代谢情况。方法：采用高效液相色谱法，色谱柱： mm×4．6 ODS(250mm，5mm)；流动相：乙腈：水(45：55)(加0．229醋酸钠)。结果：在1．2— 5．2mol／L范围内，甲苯二异氰酸酯峰面积与浓度线性关系良好(r=0．9998)，甲苯二异氰酸酯在雄性 小鼠胃中代谢生物半衰期为67．94min，甲苯二异氰酸酯在雌性小鼠胃中代谢生物半衰期为 108．62min。 关键词 甲苯二异氰酸酯体外代谢高效液相色谱法 甲苯二异氰酸酯(TDI)是一种低分子量、易挥发的化学物质，广泛应用于工业生产中，主 要是聚氨酯树脂、泡沫、油漆、涂料和塑料工业生产中¨2j。TDI的刺激性很强，特别是对呼吸 道的刺激，可能引起哮喘性气管炎或支气管哮喘，TDI是引起职业哮喘最普遍的原因∞j。长期低 剂量接触时可能引起胃功能下降，有时可能引起皮肤炎症。近年来由于建筑、装修材料的大量使 用，一些新购置的含此类物质的家具会释放出TDI，如：一些用作墙面绝缘材料的含有聚氨酯的 硬质板材；密封地板、卫生间等处的聚氨酯密封膏；一些有聚氨酯的防水涂料。释放的TDI都会 通过呼吸道进入人体，尽管浓度不高，但是往往释放期比较长，故对人体是长期低剂量的危害。 体外代谢研究可以排除体内因素干扰，直接观察酶对底物的选择代谢性，为整体试验提供可 靠的理论依据。对于体内代谢转化率低、毒性大及缺乏灵敏检测手段的毒物来说，体外代谢研究 成已为良好的研究手段。本文主要进行了TDI在小鼠胃中代谢的研究。 一、实验材料 1．实验动物 采用22～249昆明种小鼠，雌雄各半，购于哈尔滨医科大学动物中心(合格证号： 。 2．实验仪器 DKZ一1型电热恒温水浴摇床(上海一恒科技有限公司)；QL一861型涡流混合振荡器(上 海博亭经贸有限公司)；FLUKO F6／10型超细匀浆器(德国弗鲁克)；酸度计PHS一25(上海精 密科学仪器有限公司)；Sartorius 作站(浙江大学)。 3．实验药品与试剂 P](Aldrich公司)；二氯甲烷(分析纯)。 二、实验方法 1．HPLC分析条件 mm×4．6 色谱柱：ODS(250 mm，5 钠)；流速0．7 ml／min；检测波长：254nm；进样量：5ml；柱温25℃。 第七章其他相关领域研究进展 2．TDI在小鼠胃匀浆中的代谢动力学 (1)胃匀浆的制备 将禁食过夜的小鼠采取颈椎脱臼法处死，取出胃，置于冷生理盐水中洗净血污，剪去粘连的 组织。用滤纸轻轻吸干表面水分，称重。将脏器放人烧杯中用眼科剪剪碎，然后放人超细匀浆器 中制备匀浆，将匀浆倒入量筒中，用生理盐水小心洗涤匀浆管并将匀浆液倒入量筒中，最后加至 约3ml／g组织的缓冲液体积。 (2)TDI在胃匀浆中的线性范围 取0．3ml小鼠胃匀浆加2ml二氯甲烷进行灭活，加入不同浓度的TDI二氯甲烷溶液3山 (每次加入反应体系中的二氯甲烷终浓度为1％)，使反应底物的最终浓度为1．2、2、2．8、3．6、 4．4、5．2mol／L，漩涡振荡提取2rain，离心20min，精密吸取lml有机层，取101xL有机层用I 一(2一P)P液(0．01mol／L)稀释至lml，精密吸取5灿注人高效液相色谱仪进行分析。 (3)回收率实验 于失活的胃匀浆中分别加入不同的已知浓度的TDI，测定TDI在胃匀浆中的浓度，测定其萃 取回收率。 (4)TDI在胃匀浆中的代谢动力学 分别取0．3 度)，二氯甲烷的加入量为总反应体系的1％，混匀，37℃恒温水浴摇床中振荡温孵一定时间， 于0、10、30、50、70、90rain取出，加2IIll二氯甲烷终止反应，漩涡提取2min后，离心20 l普仪进行分析，测定TDI的剩余量