离体培养在植物成花研究中的应用研究.pdfVIP

园艺学进展(第五辑) 691 离体培养在植物成花研究中的应用 杨瑞陶 ‘范燕萍 ‘杜美娇2 陈厚彬’ (’华南农业大学园艺学院，广州510642;珠海香洲园林管理所，珠海519000) 摘 要 植物成花研究一直是园艺学者的重要课题。本文介绍了在离体条件下植物成花的研 究方法及所取得的进展，以期为离体条件下开花生理研究提供可行性依据和作为进一步研究的参 考材料 关键词 离体培养;成花;花发育 气习 开花是植物生活史的重要质变过程，对其调控机理进行研究，无论在理论上，还是在应用 中，特别是对以获取花朵为主要目的的花卉业来说，其重要意义更是不言而喻。从整株水平上 来研究植物花的发育机理，由于影响因素多，研究难度较大，但在离体条件下，采用植物的一部 分作外植体培养在可调节光强、温度和不同营养的半封闭容器中来进行研究，则难度较小。近 十多年来由于对细胞全能性研究的不断深人和细胞与组织培养技术的发展与完善，植物器官 发生的条件、顺序和生理生化机理以及激素和核酸等大分子在细胞分化及形态建成中的重要 性方面都得到了一些新进展[1-41，进一步促进了试管开花的研究成就。本文参阅了迄今已发 表的有关文献38篇，其中包括综述文章5篇，分别发表于1989以991以99561,1998141，和1999 年[’]，其主要内容是关于成花生理研究的进展。本文在上述文章的基础上，主要从方法角度， 并结合了近年来的研究进展和我们自己的体会，在此加以阐述和讨论，以期为我们进一步的研 究提供方法上的可行性依据。 1离体培养研究植物成花的主要方法 根据外植体的类别、组织部位和年龄的不同，主要方法可试分为下述几种: 1.1离体培养来源于营养生长期的外植体或试管苗 通过人为控制条件诱导开花，研究包括光、温、营养、激素等条件对成花的生物学效应。也 可通过测定外植体中各种生化物质(如蛋白质、糖、多胺、酶等)的变化来研究成花信号物质及 其作用机理7〔一’41 1.2从处于生殖生长期的植株上取材 采取花序轴，花柄，苞叶等作外植体进行离体培养，研究外部因子对花芽再生的影响，检测 成花决定的表达情况[[7.11,13-161 」.3 生殖器官培养 用幼穗、花蕾、花瓣、花托、花茎、花球和未成熟果实等各种生殖器官作为外植体进行离体 培养。这样可避免植株其他部分的干扰，有利于阐明花发育过程中营养物质及生长调节物质 的作用娇17,1“一751 1.4 薄层细胞(thincelllayer,TCL)培养 薄层细胞培养采用的外植体取自叶脉、叶柄和茎，用镊子从这些部位撕下由表皮层和数层 692 杨瑞陶等:离休培养4机物成花研究，】，的应川 簿壁细胞组成的组织块，因其组织成分较简单，操作简便易仃，有此植物采川其它组培方式很 难得到再生植株，而采川此法却能成功。此法主要用于器官分化，特别是花芽分化的研究。在 适1j:的条件下一般培养10-14d后花芬11J1l.接从外植体 卜分化}2一此法还J,.泛用于成花梯 度的研究 为核酸、蛋自质、糖等物质代谢的变化对花发育的影响提供r更精确的研究手 段{”15,16.18,26一到、1 1.5 离体培养子叶开花 利用子叶作为外植体，研究子叶的存在状况对花芽分化的影响，或者对离体培养子叶八接 形成的花芽、雄花、雌花进行研究1〔此实验系统还可用于研究各种因素对成花的作川。此方法 简便41行，便于分析，实验周m也较短，形成花芽部位稳定1311-?61 1.6结合微型手术的离体花芽培养 利用手术后的’!飞个花芽或某个花器官来离体培养，研究某一部位的生殖原基对其它部位 的’I殖原9的形成和发育的作用}18..31-32‘ 1.7 非无菌条件下的离体培养诱导开花 切取植物的一部分培养在类似于培养基组成并附加r一定杀菌剂的营养液1+1其后检测 成花诱导的效果或植物其他部分特别是根对成花的影响 此法对于个体比较大的植株来说更 IL可行性(111 离体培养法在植物成花研究中的应用 2_I 研究植物激素和生长调节物质对成花的作用 植物激素在花器官的启动和发育中起到靛要的作J!J，其}，‘尤以细胞分裂素的作用最为突 出 III不同的种或相同种的不同纂囚Ti,其花器官启动对激素的种类、一，’{浓度及比例的需求均 存在若 异 月长素类