玉米胚谷胱甘肽的提取及抗氧化应用的研究.docVIP

精品论文 参考文献 玉米胚谷胱甘肽的提取及抗氧化应用的研究 辛宝洪 刘敬 苏恩广 (山东金城生物药业有限公司 255100) 【中图分类号】R93【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）27-0026-02 【摘要】 目的 探讨玉米胚谷胱甘肽的提取及抗氧化应用的研究。方法 通过对还原型谷胱甘肽进行论述，玉米胚中提取技术的研究，得出其药理及其他作用。结果 超临界流体萃取法是提取玉米胚中谷胱甘肽最合适的一种方法。结论 临床上，已将GSH用于肝炎的辅助治疗，有机物及重金属的解毒，癌症辐射和化疗的保护，白内障HIV的抑制，抗氧化作用，细胞膜的保护，改善性功能等。 【关键词】玉米胚 谷胱甘肽 提取 抗氧化应用 还原型谷胱甘肽(Glutathione，GSH)是一种具有重要生理功能的活性三肽，它由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸经肽键缩合而成。它广泛存在于自然界中，动物肝脏、酵母和植物胚芽中都含有丰富的GSH，其含量高达100～1000mg/100g。本文以吉林省科技厅科技攻关项目《玉米自由基消除剂提取技术及应用的研究》中的重要研究内容为基准，主要对玉米胚中的还原型谷胱甘肽的提取及纯化工艺进行了研究，现报告如下。 1 还原型谷胱甘肽的概况 1.1 还原型谷胱甘肽的理化性质 还原型谷胱甘肽的分子量为307.33，熔点189～193℃(分解)，晶体呈白色粉末状(极板状)，等电点(pI)为5.93，易溶于水、稀醇、液氨和二甲基甲酰胺，而不溶于醇、醚和丙酮。有研究显示GSH在高水分活性下不易保存，其成品见光易分解易氧化。 1.2 还原型谷胱甘肽的生理功能 还原型谷胱甘肽分子中含有一个特异的delta;-肽键，其由谷氨酸的delta;-羧基与半胱氨酸的alpha;-氨基缩合而成，且半胱氨酸侧链基团上连有一个活泼巯基，是GSH多重要生理功能的结构基础。还原型谷胱甘肽具有广泛的生物功能，目前研究已证实，GSH在许多重要的生物学现象中起着直接或间接的作用，如蛋白质和DNA的合成、物质的运输、酶的活性、新陈代谢及保护细胞等。GSH作为许多酶反应的辅基，可清除体内过多的自由基，参与体内三羧酸循环及糖代谢，并具有解毒，延缓衰老、预防糖尿病和癌症以及消除疲劳等作用。 2 提取方法 2.1 提取还原型谷胱甘肽的工艺流程 玉米胚-清选及破碎-CO2超临界流体萃取脱脂-细胞破壁-浸提-离心分离-超滤-柱层析离子交换分离提纯-等电点沉淀-真空浓缩-真空干燥-成品。 2.2 原料预处理 由于玉米胚中混杂有碎粉、皮屑、胚根鞘等，需要用往复式双层振动筛进行筛理，将上述杂质全部去除，接着用浅盘或流槽以清水连续漂洗几次分离出胚芽，随即洒干或烘干至水分含量10％以下。 在提取脂肪前，必须将玉米胚进行破碎，破坏细胞组织，使脂肪游离。破碎作业的好坏对脱脂影响很大，破碎太粗，脂肪不能全部游离出来，磨的太细可能导致谷胱甘肽变性。为了有效的进行玉米胚的磨碎，通常采用植物粉碎机使其粒度达到60目以上。 2.3 超临界CO2流体萃取 玉米胚脱脂的方法主要有：压榨法、有机溶剂浸出法、超临界CO2萃取法。超临界CO2萃取法是近年来国际上取得迅速发展的分离新工艺。 由于CO2化学性质稳定，无毒性和腐蚀性、无着火和爆炸危险、来源方便、价格便宜、临界温度30℃为长温、临界压力72.9atm较易达到，整个分离操作可在接近室温下进行，是提取脂肪用的最多的一种方法。 3 结果 3.1 玉米胚中脂肪含量高达58.45％，将影响谷胱甘肽的提取及纯化，必须最大限度的把脂肪提取出来。本研究通过对比试验选用超临界流体萃取法进行脱脂，采用正交试验确定出萃取的最佳工艺条件为：萃取压力25MPa；萃取温度为40℃；萃取120min；CO2流量为20L/min，采用此法能够脱除脂肪57.03％。 3.2 本研究采用对比试验确定了最佳细胞破壁方法为超声波破碎，并且确定超声波破碎工艺条件为：工作时间5s、间隔5s、超声次数30次、温度室温、输出功率为400W。 3.3 本研究以提取玉米胚中的还原型谷胱甘肽为出发点，成功试验了四种抽提方法，即热水抽提、甲酸抽提、乙醇抽提及硫酸抽提。结果表明热水抽提为首选的方法。 3.4 经过正交试验对热水浸提的工艺条件进行比较，确定出最佳热水浸提的工艺条件为：固液比为1:15g/mL；浸提温度：90℃；浸提液pH值：3.0；浸提时间：15min，热水浸提的谷胱甘肽的最