谷胱甘肽和肌肽促黄羽肉鸡生长及其机制的研讨.pdf

摘 要 为研究谷脱甘肤(GSH).肌肤汁肉鸡生长的影响，本研究以黄羽肉 鸡为试验对象，分别进行了饲养试验、离体细胞培养及基因表达检测， 试图从整体、细胞及分子水平三个层面阐明GSH.肌肤促肉鸡生长的 机制，为生物活性肤作为饲料添加剂应用于肉鸡生产，促进肉鸡的健 康生长提供理论依据。 在整体的试验中，选取4d的黄羽肉鸡共120羽，随机分为4组(对 照组，GSH低、高剂量组，肌肤组)，每组30羽。对照组饲喂基础日 根，GSH低、高剂量组、肌肤组分别饲喂在基拙p根中添加还原型GSH 80.160mg/Kg.肌肤20mg/Kg的日粮，进行55天的饲养试验。记录 生产性能指标，于58d时每组宰杀巧只鸡并制备血清样品，测定血清 中IGF-1、FT:和FT;水平. 在离体的细胞培养试验中:1)取Id黄羽肉鸡的十二指肠进行细胞 培养，分别在细胞培养液中添加0.500.1000.2000mg/LM量的GSH, 检测其对鸡小肠上皮细胞增殖及吸收功能、细胞膜畴活性的影响;2) 取8d黄羽肉鸡的肝细胞进行细胞培养，检测分别在培养液中添加0、 500.1000.2000mg/L*1量的GSH,0.300.500.1000mg/L剂量的 肌肤对肝细胞增殖、分泌IGF-1水平的影响，并检测了在培养液中添加 1000mg/LGSH.500mg/L肌肤对肝细胞GHR.IGF-1基因表达的影响; 3)取 5d黄羽肉鸡的骨骼肌卫星细胞进行细胞培养，检测分别在培养 液中添加0.250.500,1000mg几411量的GSH,0.100.300.500mg/L 剂量的肌肤对鸡骨骼肌卫星细胞增殖、分泌IGF-1水平的影响。 结果表明: 1.日根添加GSH.肌肤对黄羽肉鸡的生产性能有一定的促进作用。 与对照组相比，GSH低、高剂量组、肌肤组的平均日增重分别提高了 4.4%.2.6%.1.68%e 2在日粮中添加GSH.)UL肤可以显著提高黄羽肉鸡血清中的IGF-1 水平 (p0.05)，同时日粮添加 GSH可以显著提高黄羽肉鸡血清中的 FT3水平(p0.05). 3.GSH对离体培养鸡小肠上皮细胞增殖和对葡萄糖的吸收功能有 促进作用，可以提高鸡小肠上皮细胞的碱性磷酸阵，Na`一K`.ATP酶 活性。相对于对照组，添加低剂量 (500mg/L)的GSH对鸡小肠上皮 细胞的增殖有显著的促进作用 (p0.005)。添加GSH的各试验组细胞 的葡萄糖吸收量都显著高于对照组((p0.05)，并且随着添加GSH浓度增 加，其对细胞吸收葡萄糖的作用逐渐增强，具有浓度依赖性。 4.GSH,肌肤可以提高离体培养鸡肝细胞的增殖及分泌IGF-1的 水平。在培养液中添加500m创L的GSH对肝细胞的增殖有显著的促进 作用(P0.05)，添加500mg/L,1000mg/L剂量的肌肤对肝细胞的增殖 有显著的促进作用(p0.05)。在培养的144h，添加了GSH,肌肤的各 试验组细胞分泌IGF-I的水平均高于对照组，其中GSH的500mg/L, 2000mg/L剂量组，肌肤的500mg/L剂量组显著性的高于对照组 (P0.05), 5.分别在细胞培养液中添加1000mg/L的GSH,500mg/L的肌肤 可以提高离体培养的鸡肝细胞GHRmRNA,IGF-ImRNA的表达水平的 趋势。 6.GSH,肌肤可以提高离体培养的鸡骨骼肌卫星细胞的增殖及分泌 IGF-1的水平。添加250mg/L的GSH对鸡骨骼肌细胞卫星的增殖有显 著的促进作用(p0.05)，不同*J量肌肤(100mg/L,300mg/L,500mg/L) 的添加都对鸡骨骼肌卫星细胞的增殖有显著的促进作用 (p0.05)。添 加NL肤各组的IGF-1水平都高于对照组，其中500mg/L剂量组显著高 于对照组 (P0.05)，添加 GSH各组的 IGF-1水平也高于对照组 (P0.05). 以上结果提示:GSH,肌肤可以显著提高黄羽肉鸡血清中的IGF-1 水平;GSH可以促进小肠上皮细胞的增殖、酶活性及吸收功能的增强; GSH,肌肤能提高肝细胞增殖活性，增强肝细胞GHR,IGF-1基因的 表达水平及IGF-1的分泌水平，提高骨骼肌卫星细胞增殖及分泌IGF-1 的功能。这些因素可能与GSH,肌肤的促生长作用相关。 关健词:黄羽肉鸡;生长;谷耽甘肤;肌肤;细胞培养;基因表达 前 言