大肠杆菌O157H7和乳源蛋白胶体金免疫层析试纸条的研制研究.pdf

疫 层析试纸条的研制 学科门类：工学 一级学科：食品科学与工程 培养单位：生命科学与工程学院 硕士生：符海英 导师：宋宏新教授 201 2年5月 ＼蚓删 GoLD DEVELoPMENTOFCoLLoIDAL STRIP 0157：H7 oFE．CoLl FoRDETECTIoN ANDBoVINEPRoTEIN A to Thesis(orDissertation)Submitted and Shaanxi ofScience University Technology the forthe of inPartialFulfillmentof Degree Requirement Masterof Engineering Fu By Hai--ying Thesis SongHong—xin Supervisor：Professor LecturerXue Hai--yan May,2012 胶体金免疫层析法检测乳中大肠杆菌0157：H7和乳源蛋白含量具 有快速、灵敏、可用于现场检测等优点，对乳品的掺假及安全性检 测具有重要意义，本课题对柠檬酸钠还原法、抗坏血酸还原法制备 平均粒径为20nm的胶体金颗粒的条件进行了优化，并对两种方法制 得的胶体金进行了抗体标记比较研究，综合考虑后得出最佳的胶体 金制备条件及方法，接着通过试验确定了试纸条的各固相组成材料， 最后研究、制备了大肠杆菌0157：H7和牛乳源蛋白p．酪蛋白胶体金免 疫层析试纸条，并对试纸条的性能进行测定，证实可用于脱脂乳中大 肠杆菌0157：H7和乳源蛋白的检测分析。 特异性多克隆抗体的制备：以大肠杆菌0157：H7菌体和牛乳源蛋 结果显示抗体纯度达到90％以上。 胶体金制备方法的确定：采用柠檬酸钠还原法、抗坏血酸还原 法制备平均粒径为20nm的胶体金颗粒，对还原剂加入量、加热时间 00ml0．0 进行优化，得出两种方法的最佳制备条件为：1 1％四氯金酸 0min，1％抗 溶液中，1％柠檬酸钠的添加量为1．5ml，加热时间为1 体标记比较研究，柠檬