表达及其生物学活性.PDFVIP

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2018-11-17 发布于天津
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表达及其生物学活性.PDF

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( ) 第 17卷第 2期江苏大学学报医学版 Vol. 17 No. 2 2007年 3月　 ( ) 　 M ar. 2007 Jou rnal of J iangsu U n iversity M edicine Edition 　　　　　　 V EGF 的载体构建、表达及其生物学活性 165 1, 2 1 2 2 2 2 2 陈小波 , 黄锡全 , 张　隆 , 马艳春 , 孙　健 , 季　青 , 康向东 ( 1. 江苏大学医学技术学院 ,江苏镇江 2 1200 1; 2. 上海中医药大学附属普陀医院 ,上海 200062) ( ) [摘　要 ] 　目的: 构建血管内皮生长因子 V EGF 165原核表达载体 ,在大肠杆菌中表达 ,获得重组 V EGF165 ,并通过细胞和鸡胚尿囊膜试验鉴定其生物学活性。方法 : 本实验室保存的 TV EGF165质粒 ,经 B am H Ⅰ和 E coR Ⅰ双酶切 ,将其克隆至原核表达载体 p ET28a ( + ) 中 ,获得含人 V EGF165全序列基因的表达载体 p ET28a ( + ) V EGF165 ,将其转化至大 ( ) 肠杆菌 BL2 1 D E3 ,用 IPTG诱导表达 ,对表达产物进行纯化 ,获得 V EGF165蛋白。通过体外促进 HUV EC细胞增殖及鸡胚尿囊膜血管增生实验鉴定其生物学活性。结果 : 成功构建了 V EGF165蛋白的原核表达载体 ,表达纯化了 V EGF165 蛋白,经过细胞增殖试验及鸡胚尿囊膜血管增生实验 ,证明该蛋白具有良好的促进血管内皮细胞增殖的生物学活性。结论 : 成功地获得了人 V EGF165重组蛋白,并证实了该蛋白具有促进血管内皮细胞增殖活性。 [关键词 ] 　血管内皮细胞生长因子 ; 鸡胚尿囊膜 ; 血管内皮细胞 [中图分类号 ] 　R392. 12　　[文献标识码 ] 　A 　　[文章编号 ] 　1671 - 7783 (2007) 02 - 012 1 - 03 Expression and b iolog ica l activ ity test of the VEGF165 1, 2 1 2 2 2 2 2 CHEN X iaobo , HUAN G X iquan , ZHAN G L ong , MA Yan chun , SUN j ian , J I Q ing ,