B型钠尿肽及N末端B型钠尿肽原在心衰管理中的临床价值及其实验室检测的注意事项研究.pdf

B型钠尿肽及N末端B型钠尿肽原在心衰管理中的临床价值及其 实验室检测的注意事项 史晓敏徐国宾 北京大学第一医院检验科100034 1988年deBold从猪脑中发现了一种具有利钠利尿作用的多肽，命名为脑钠肽(brain natriuretic natriuretic peptide)，又称B型钠尿肽(B-typepeptide，BNP)f11。很快发现，BNP 的主要分泌部位在心室(2】。人心肌细胞首先合成的是含108个氨基酸的B型钠尿肽原 natriuretic (pro-B-type peptide，proBNP)，之后在内切酶的作用下被切割为含76个氨基酸 natriuretic 8．5kD) 的N末端B型钠尿肽原(N-terminal pro—B-type peptide，NT-proBNP，MW 3．5 和含32个氨基酸的C端多肽BNP(MWkD)【3】。钠尿肽家族的分子结构中包括由二硫 键连接构成的环状结构，可与钠尿肽受体结合发挥利钠、利尿、扩血管、拮抗肾素一血管紧 性刚。当心室容量负荷或压力负荷增加时，心肌合成和释放BNP／NT-proBNP就会增多。国 外大规模多中心临床试验的结果证实，BNP／NT-proBNP是诊断心衰的较好的心肌标志物【3，51。 of 欧洲心脏病协会(EuropeanSociety ofClinical Academy 入了其起草的“心衰诊断及治疗指南”和“心肌标志物的应用指南”中【6，71。欧美国家对 于BNP／NT-proBNP的临床应用研究已有十余年，成熟的试剂盒已被广泛应用于心衰疾病的 诊断和鉴别诊断。我国对于BNP／NT-proBNP的临床研究才刚刚起步【8～，检测 BNP／NT-proBNP的免疫试剂进入中国不到一年，他们的生物学特性、临床应用等诸多方面 还有许多内容未被大家所认识。本文简要评述了BNP／NT-proBNP在心衰管理中的作用及其 实验室检测的注意事项。 一、BNP与NT-proBNP的生物学特性比较 proBNP的裂解是发生在心肌表达原位还是分泌入血之后仍不清楚。由于proBNP等摩 clearance peptide 清除，中性内肽酶(neutral min，它在提示机体急性血流动力学改变或 响要远远大于BNI。人体内BNP的半衰期为22 反映临床治疗效果方面有明显的优势，但其稳定性差，不利于实验室测定。NT-proBNP的 半衰期为120min而且体外稳定，有利于实验室测定，在心衰患者中的浓度较BNP高l—lO 倍，有利于心衰的诊断[31。 二、实验室测定 1．测定方法 目前商品化的试剂盒分为床旁快速检测类(Point-of-Caretest,POCT)和 BNP检测试剂即属POCT产品，由Biosite 免疫化学发光类。美国FDA第一个批准的Triage 生产，采用双抗夹心免疫荧光法检测。化学发光类产品一般选用两株针对不同抗原表位的单 克隆抗体，一株为捕获抗体。另一株为检测抗体，分别与BNP的C端区域和环状结构结合 进行测定。如Beckman N端第l～2l氨基酸残基和中段第39—50氨基酸残基的多克隆抗体，用双抗夹心电化学发光 技术检测血清中的NT-proBNP。DadeBehring公司也推出了碱性磷酸酶偶联辣根过氧化物 酶，以Trinder反应为指示系统的酶联免疫吸附比色的NT-proBNP检测试剂。 精密度要求(表1)。其中，检测NT-proBNP的电化学发光法检测线性范围最宽，精密度最 好。比较BNP的几种方法之间的精密度发现，高通量全自动免疫发光技术要优于POCT方 法。由于目前BNP／NT-proBNP的检测普遍采用的是高通量的免疫发光或免疫荧光法，彼此 之间可比性好。因此我们推荐在有条件的医院。应首选在中心化验室开展免疫发光或免疫荧 光法检测BNP／NT-proBNP，在