同型半胱氨酸作为心脑血管疾病的独立危险因子及其临床检测意义研究.pdfVIP

同型半胱氨酸作为心脑血管疾病的独立危险因子及其 临床检测意义 袁崇生 美国Diazyme研究所 一、 同型半胱氨酸的代谢与疾病 同型半胱氨酸(Homocysteine，Hcy)又称高半胱氨酸，是蛋氨酸去甲基后形成的一个含硫氨基 医学院病理专家Kilmer Mecully通过注意到一个八岁男孩和一个两个月婴儿死于广泛性的 脑卒中，经研究发现高浓度Hcy与动脉损伤和动脉粥样硬化相关。高Hcy水平可导致动脉 血管壁内皮片状脱落，同时刺激平滑肌细胞增生，引起血管损伤，出现类似动脉粥样硬化性 病理改变。大量的临床数据表明，当血中Hcy浓度高于15umol／L时．患者就有较高的心脏 病、中风、外周血管疾病及静脉栓塞的发病率。美国15000名内科医生对Hcy的研究表明， 博士认为当血中Hcy值大于12umol／L时，冠状动脉疾病的危险性翻倍。 近年来大量临床研究结果显示，Hcy与许多疾病存在相关性。如：动脉粥样硬化、冠心病、 中风、栓塞、老年痴呆、新生儿缺陷、早产，骨质疏松、糖尿病和肾病等。当前Hcy已成 为医学界研究的热点。 过去Hcy在心血管疾病中的重要性，被某些指标掩盏。例如胆圃醇，其原因是药商更愿意 投入较高的经费研究胆固醇，因为开发降胆固醇药物可获巨额利润，而降Hcy可通过补充 廉价的B族维生素和叶酸来解决，因而对药商而言，商业价值不大，故无兴趣参与对同型 半胱氨酸的研究与临床应用的推广，从而迟滞了Hcy的研究与应用的进展。另一个使Hcy 的临床应用迟滞的原因是直至九十年代末，一直没有一个简便快速的Hcy测试方法。在很 长一段时期，人们一直用HPLC方法测同型半胱氨酸，而HPLC方法不适合样品量大的临 床检验实验室。 二、Hey的临床检测 根据世界卫生组织的报告，全球每年有1660万人口死于心血管病，每年有约1500万人由于 轻度中风而幸存，中国每年因心脑血管死亡的人数约有200万，平均每小时300人。美国心 脏病协会宣布的数字表明每五个人就有一个人(全美5800万人)有各种类型的心血管疾 病，并在检测中发现，80％心血管患病者无胆固醇异常，50％的患者无遗传、年龄、吸烟史、 高血压、肥胖和糖尿病等危险因子异常，后来的研究表明很多心血管病与高Hcy血症相关。 临床研究已证明Hcy是心脑血管疾病的一个非常重要的独立危险因子。2001年美国心脏病 医生协会正式把Hcy检测向临床推荐，当年Hcy检测数已达1500万人次，之后每年以30 ％的速度增长，英国现在每年Hey的检测也达900．1000万人次。我国由于检测方法和费用 的限制，一直未能广泛的开展。目前，Hey的测试方法有以下四大类： 1、同位素法 2、高压液相色谱法 3、免疫学法 4、生化酶法。 第l，2种方法仪器价格高昂、操作繁琐，同位素法还有污染，多用于实验室研究。第3种 方法适用于临床，但需要专门购买仪器和配套试剂，成本偏高。 第四种生化酶法是近年来出现的一种适用于各种全自动生化分析仪的试剂盒，它利用循环酶 法的原理将血样中的Hey放大以提高测试的灵敏度和精确度。酶法Hey测试的反应原理与 步骤如下： SAH+Met +Ado ／uⅢ‘ AdO————哆Inosine+NH3 bLUn。 Ni 13+NADH+2．Oxoglutarate—————争Glutamate+NAD++H20 此试剂盒由3个液体稳定的试剂组成(Rl，R2，R3)，HCY与共价底物S．腺苷甲硫氨酸 半胱氨酸(SAH)。SAH被SAH水解酶水解成腺苷和HCY，形成的HCY可以循环加入反应， 从而放大了检测信号，腺苷(Ado)立即水解为次黄嘌呤和氨，氨在谷氨酸脱氢酶的作用下。 使NADH转化为NAD+，样本中的HCY的浓度与NADH的变化成正比。试剂盒含有两个标 准及有四个水平的质控血清，充分保证了检测结果的精密度和准确性，试剂盒的灵敏度为 新的Rl，原R3作为R2用于那些只能处理2试剂的仪器。 此Hey循环酶法试剂盒，目前该产品已通过国家SFDA技术检测，国家卫生部临床检验中 心临床评价报告合格，同时已在美国获得FDA注册认证和欧洲的CE