抗人转铁蛋白受体单克隆抗体增强姜黄素对雄激素非依赖性前列腺癌抑制效应的实验研讨.pdfVIP

华中科技大学 博士学位论文 抗人转铁蛋白受体单克隆抗体增强姜黄素对雄激素非依赖性前 列腺癌抑制效应的实验研究 姓名：刘双林 申请学位级别：博士 专业：外科学（泌尿外） 指导教师：叶章群;胡志全 2010-04 华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 中文摘要 第一部分 姜黄素对雄激素非依赖性前列腺癌体外抑制效应的研究 目的 了解姜黄素在体外对雄激素非依赖性前列腺癌细胞的抑制效应。 方法 采用不同浓度的姜黄素（6.25μmol/L 、12.5μmol/L 、25μmol/L 、50μmol/L 和100μmol/L ）作用于雄激素非依赖性前列腺癌细胞，MTT法检测姜黄素对细胞生长 活性的影响。然后分别采用CFSE染色、Annexin V-PI染色和PI染色法，使用流式细胞 仪分析姜黄素对PC-3细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。 结果 MTT结果显示6.25μmol/L 、12.5μmol/L 、25μmol/L和50μmol/L 四个浓度的 姜黄素处理24小时后，PC-3细胞的活性未受显著影响；而100μmol/L 的姜黄素则对PC-3 细胞产生显著的细胞毒性作用。50 μmol /L 的姜黄素作用后，PC-3 细胞的增殖指数从 7.08 ± 0.20降到 4.38 ± 0.19 ( P 0.05) ；凋亡率从(5.34 ± 0.96)%提高到(21.53 ± 2.87)% (P0.05) ；G2/M期细胞比例由(34.27 ±1.87)%上升到(57.29 ±1.91)% (P0.05) 。 结论 姜黄素能在体外显著抑制雄激素非依赖性前列腺癌细胞的增殖，诱导细胞 凋亡并导致细胞周期的阻滞。 关键词 姜黄素；雄激素非依赖性前列腺癌；增殖；凋亡；细胞周期 5 华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 第二部分 姜黄素对雄激素非依赖性前列腺癌细胞内信号通路活性的影响 目的 明确姜黄素对雄激素非依赖性前列腺癌细胞内信号通路活性的影响，探讨 姜黄素抗瘤效应产生的可能机制。 方法 采用荧光素酶报告基因系统检测姜黄素在体外对核因子-κB (NF-κB 、激活蛋 白-1 (AP-1)、Elk1 、CHOP 和 CREB 五个信号通路的影响，以带有荧光素酶报告基因 的质粒（pNF-κB-Luc ，pAP-1-Luc ，pElk1-Luc ，pCHOP-Luc ，pCREB -Luc ）转染PC-3 细胞，姜黄素干预后，检测荧光素酶活性。 结果 荧光素酶活性检测结果显示，姜黄素能在体外显著抑制 NF-κB 和 AP-1 两 个细胞内信号通路的活性( P 0.05) ，而对Elk1 、CHOP 和 CREB 三个信号通路的活性 影响不明显。 结论 姜黄素可能通过抑制 NF-κB 和 AP-1 信号通路发挥抑癌效应。 关键词 姜黄素；雄激素非依赖性前列腺癌；信号通路；NF-κB ；AP-1 6 华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 第三部分 抗人转铁蛋白受体单