HSP70CD80嵌合DNA疫苗通过调节Th1Th2平衡对哮喘小鼠气道重建的影响(1)研究.pdf

11 1 11111,1IlllI1Illllll帅 LIIIII Y1786574 目 录 翘道重建的影响……………………………………………………．1 1．1 中文摘要………………………………………………………．．1 1．2 英文摘要………………………………………………………．．5 1．3 前言……………………………………………………………11 1．4 材料与方法……………………………………………………l5 1．5 结果……………………………………………………………29 1．6 讨{念……………………………………………………………4l 1．7 结论……………………………………………………………49 1．8 参考文献………………………………………………………50 1．9 英汉缩略词对照表……………………………………………55 2 致谢……………………………………………………………57 3 TGF．13信号转导通路在哮喘气道重建中的作用(综述) …………………………………………………………………58 乙 型，观察HSP70／CD80嵌合疫苗对哮喘小鼠气道高反应性 的机制，为临床哮喘病及其它变应性疾病的防治提供实验依据，以期 获得免疫原性强、安全可靠的新型免疫调节性疫苗。方法：鉴定 合质粒。核酸定量仪测定所提质粒含量和纯度，将质粒溶于生理盐水。 将40只雌性健康BALB／c小鼠随机分为4组：对照组、哮喘组、 注射后，用OVA致敏小鼠。哮喘组用OVA致敏建立哮喘模型，对 照组用生理盐水代替。最后一次OVA激发后24h，通过全身体积描 记仪检测吸入乙酰甲胆碱后小鼠气道反应性，以Penh(enhanced pause) 较基线增高的倍数来反映支气管反应性的高低；常规苏木素．伊红 碘雪夫酸(periodic 泌情况；Masson三色染色观察气道壁胶原沉积；免疫组化增殖细胞 cellnuclear 核抗原(proliferating lavage PCR检测脾脏组织 ．4(interleukin．4，IL．4)含量的变化；Real．Time T．bet、GATA．3基因的表达水平。结果：1．给予不同浓度乙酰甲胆 碱刺激后，哮喘组和载体组小鼠的气道反应性较对照组明显增高，在 乙酰甲胆碱浓度达6mg／ml后，哮喘组、载体组小鼠较对照组小鼠开 始有明显差异(尸O．050)；在乙酰甲胆碱浓度达6mg／ml后，疫苗组小 鼠较哮喘组开始有明显差异(氏O．050)。2．与对照组比较，哮喘组和 载体组小鼠气道壁增厚，差异有统计学意义耿O．050)。与哮喘组相比， 疫苗组能有效改善气道重建，差异具有统计学意义(PO．050)。3．与 对照组比较，哮喘组、载体组支气管上皮中PAS染色阳性的杯状细 胞明显增多，差异有统计学意义(尸O．050)；与哮喘组相比，疫苗组能 有效抑制杯状细胞增生，数量减少，差异有统计学意义(尸O．050)。4． 哮喘组和载体组气道上皮下呈蓝色的胶原纤维明显增厚；对照组和疫 苗组上皮下仅有少量蓝色的胶原纤维沉积。5．与对照组比较，哮喘 组、载体组支气管上皮下肌层增生明显，总平滑肌细胞和PCNA阳 一： 性的平滑肌细胞明显增多，差异有统计学意义(PO．050)；与哮喘组相 比，疫苗组能有效抑制平滑肌细胞增生，总平滑肌细胞和PCNA阳一 性的平滑肌细胞数量减少，差异有统计学意义(尸O．050)。6．与对照 ： 期相符，为进一步研究其在动物体内的免疫学效应奠定了基础。2． 下胶原沉积、平滑肌细胞增生，对慢性哮喘气道重建表现出抑制作用。 平衡起到了预防慢性哮喘气道重建的发