海洋裂殖壶菌DHA生物合成PKS途径的研讨.pdfVIP

4宁-史壶 奎国谆耳生番技术与痒耳16曲学术套议静文毒 2006．8-2-6 海洋裂殖壶菌DI／A生物合成PKS途径的研究 江贤章黄建忠 (福建师范大学生命科学学院，福州，350007) 摘要：二十二碳六烯酸(Docosahexaenoicacid，简称DHA)是目前发现的碳链最长、不饱和度最高的∞一3 fatty 长链高度不饱和脂肪酸(Long-chainpolyunsaturated 脂．降血压．预防各种癌症等重要生理功能．传统的观点认为，DHA是在线粒体或内质网上通过一 Photobacteriumprofundum中相继发现类似脂肪酸合成酶(Fattyacid 酶(Polyketide rRNA基 高产DHA，可作为研究高度不饱和脂肪酸生物合成的模式生物，具有很高的研究价值．18S 因进化分析表Schizochytrium Schizochytrium DHA奠定了基础． ’ 签，获得了SchizochytriumDHA生物合成全部的关键基因，主要有丙二酰辅酶A酰基裁体蛋白转移 cDNA文库中，同时迂获得了完整的电子侍逆链相关的全部基因，主要有 原酶等．在Schizochytrium NADH脱氢酶．琥珀酸脱氢酶、细胞色素还原酶．细胞色素氢化酶以及ATP合成酶等． 烯脂酰还原通常被省去而直接进行酮基合成，结果生成一系列多酮基化合物前体．这些前体最后经过 脱氢或还原，生成高度不饱和脂肪酸．脱下的氢经电子传递链合成ATP． 关键词 高度不饱和脂肪酸；二十二碳六烯酸；裂殖壶菌；cDNA文库；多聚乙酰合成酶 二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic fatty 长链高度不饱和脂肪酸(Long．chainpolyunsaturated 脂、降血压、预防各种癌症等重要生理功能114J。传统的观点认为，DHA是在线粒体或内质网上通过 marina、Photobacterium acid profundum中相继发现类似脂肪酸合成酶(Fatty 乙酰合成酶(Polyketide 价值。18S rRNA基因进化分析表Schizochytrium 俺素标记征明了Sch亡．ochytrium 4{I 互孽·土t ◆童瘁耳t糟技术与辱洱焉§学术套tt电-善 2006．8．2-6 为转基因技术生产DHA奠定了基础。 材料与方法 材料与菌种 sp．FJU·512．系本研究小组从海水中分离纯化并保存。 裂殖壶菌Schizoehytrium 培养基(g．L-1)：葡萄糖30．蛋白胨10，酵母抽提液5，海水晶15。 主要试剂 TotalRNAIsolation GENECHIPlNC) Reagent：Unizol((BIOSTAR 11RNaseH-Reverse SuperScriptTM Transeriptase(Invitrogen) mRNA OligotexaKit(QIAGEN) T4DNA Polymerase(Promega) Kit GelExtraction Protocol(QIAGEN) PCRPufifiemon Q1AquickR Kit(QIAGEN)